Mnk2 CRISPR/Cas9 KO Plasmid (m): sc-421658
- Zielspezies: mouse
- 20 µg transfektionsfertige, aufgereinigte Plasmid DNA; geeignet für 20 Transfektionen
- Mnk2 Das CRISPR/Cas9-Knockout (KO)-Plasmid (m) ist ein Pool von Plasmiden, von denen jedes für die Cas9-Nuklease und eine zielspezifische 20-nt-Guide-RNA (gRNA) kodiert, die für maximale Knockout-Effizienz unter Verwendung von Sequenzen aus der GeCKO v2-Bibliothek entwickelt wurde
- gRNA-Sequenzen lenken Cas9 so, dass es ortsspezifische Doppelstrangbrüche (DSBs) im Mnk2-Genomlokus induziert, was zu einem Gen-Knockout durch nicht-homologe Endverknüpfung (NHEJ) führt
- Die Puromycin-Resistenz- und RFP-Gene werden von LoxP-Stellen flankiert, was die Entfernung der Selektionsmarker mittels Cre-Rekombinase (Cre-Vektor: sc-418923) nach der Etablierung stabiler Knockout-Zelllinien ermöglicht
- Nach der Transfektion kann die Effizienz des Gen-Knockouts per Western Blot oder histologisch mit folgendem Antikörper überprüft werden: Mnk2: sc-271559
Bestellinformation
| Produkt | Katalog # | EINHEIT | Preis | ANZAHL | Favoriten | |
Mnk2 CRISPR/Cas9 KO Plasmid (m) | sc-421658 | 20 µg | $397.00 |
Übersicht
Das murine Gen **Mknk2** kodiert die MAP-Kinase-interagierende Serin/Threonin-Proteinkinase 2 (Mnk2), einen nachgeschalteten Effektor der ERK- und p38-MAPK-Signalwege, der die Initiation der Translation durch Phosphorylierung von eIF4E und verwandten Komponenten der cap-abhängigen mRNA-Translationsmaschinerie moduliert. Über diesen Knotenpunkt integriert Mnk2 Stress- und mitogene Signale, um die selektive mRNA-Translation zu steuern, und beeinflusst dadurch Zellwachstum, Überleben und entzündliche Antworten. Eine veränderte Aktivität der MNK–eIF4E-Achse wurde mit fehlregulierten Proteinsyntheseprogrammen in der Krebsbiologie und bei immunvermittelten Erkrankungen in Verbindung gebracht, was **Mknk2** zu einem nützlichen Ansatzpunkt für die Untersuchung MAPK-gesteuerter Translationskontrolle in Mausmodellen macht. Die funktionelle Analyse von Mnk2 unterstützt zudem Studien zu Signalweg-Crosstalk, Immediate-Early-Gen-Antworten und kontextabhängiger Translation unter Stress.
Das Mnk2 CRISPR/Cas9-KO-Plasmid (m) ist ein Pool von Plasmiden, die für die gezielte Disruption des Mknk2-Gens in mouse-Zelllinien entwickelt wurden. Jedes Plasmid koexprimiert eine einzigartige Single-Guide-RNA (sgRNA), die auf eine bestimmte Stelle innerhalb des Mknk2-Gens abzielt, zusammen mit der Streptococcus pyogenes Cas9-Nuklease. Die Plasmide kodieren zudem für GFP, was die fluoreszente Identifizierung und Anreicherung erfolgreich transfizierter Zellen mittels Fluoreszenzmikroskopie oder Durchflusszytometrie ermöglicht.
Das Multi-Guide-Design erhöht die Wahrscheinlichkeit, dass Insertionen oder Deletionen (Indels) entstehen, die den offenen Leserahmen von Mknk2 nach der Cas9-vermittelten Bildung von Doppelstrangbrüchen unterbrechen. Durch das CRISPR/Cas9-System verursachte DNA-Brüche werden über endogene NHEJ-Wege (Non-Homologous End Joining) repariert, was häufig zu Frameshift-Mutationen führt, die die Mnk2-Proteinexpression aufheben.
Dieses CRISPR-Knockout-System ermöglicht die effiziente Erzeugung von Mknk2-defizienten Zellmodellen zur Untersuchung der Mnk2-Signalübertragung, für funktionelle Genomstudien, in der Krebsbiologieforschung sowie zur Bewertung therapeutischer Reaktionen in menschlichen Zelllinien.
Hauptmerkmale
- sgRNAs, die auf Mknk2-Exone abzielen, die für die Mnk2-Funktion entscheidend sind
Ko-Expression von SpCas9 und sgRNA aus einem einzigen Plasmid zur vereinfachten Verabreichung
GFP-Reporter zur Identifizierung transfizierter Zellen
Pool von Plasmiden, die auf mehrere Mknk2-Genomstellen abzielen, um die Knockout-Effizienz zu verbessern
Kompatibel mit der Verabreichung durch Transfektion
Designvarianten
CRISPRs +/- HDRs
- gRNAs, die vom Mnk2 CRISPR/Cas9-KO-Plasmid (m) und vom Mnk2 CRISPR/Cas9-KO-Plasmid (m2) kodiert werden, zielen auf unterschiedliche Stellen innerhalb des Mknk2-Lokus ab. Es kann ein oder beide Targeting-Designs verfügbar sein. Siehe „Verwandte Produkte“ für Verfügbarkeit.
HDR-Donorkonstrukte, kodiert durch das Mnk2 HDR-Plasmid (m) und Mnk2 HDR-Plasmid (m2) kodiert, enthalten eine Puromycin-Resistenzkassette und einen RFP-Reporter, flankiert von Mknk2-Homologiearmen, um die homologe Reparatur an definierten Mknk2-Zielstellen entsprechend den CRISPR/Cas9-KO-Designs zu unterstützen. Die Verfügbarkeit von HDR-Donoren kann variieren. Siehe „Verwandte Produkte“ für Verfügbarkeit.
Nur für Forschungszwecke. Nicht für diagnostische oder therapeutische Zwecke bestimmt.