Plasmide Double Nickase (h) MMP2: sc-400126-NIC

Le gène humain **MMP2** code la métalloprotéinase matricielle-2 (gélatinase A), une endopeptidase dépendante du zinc qui dégrade le collagène de type IV et d’autres substrats de la matrice extracellulaire (MEC), régulant ainsi le remodelage de la membrane basale et les interactions cellule–matrice. L’activité de MMP2 est contrôlée par sa sécrétion sous forme de zymogène, son activation à la surface cellulaire et son inhibition par les TIMP, ce qui l’associe à la protéolyse péricellulaire et aux changements dynamiques de l’architecture tissulaire. Via le renouvellement de la MEC, MMP2 influence l’angiogenèse, la réparation des plaies, l’inflammation et les voies de migration cellulaire dépendantes de la signalisation des intégrines et des cascades protéasiques. Une expression ou une activité dérégulée de MMP2 est associée au remodelage pathologique de la matrice observé lors de l’invasion et des métastases tumorales, du remodelage cardiovasculaire, ainsi que dans des affections fibrotiques et inflammatoires, ce qui en fait une cible majeure pour les études mécanistiques de la régulation du microenvironnement tissulaire.

MMP2 Le plasmide double nickase (h) se compose d'une paire de plasmides appariés, conçus pour une édition hautement spécifique du locus MMP2 dans les lignées cellulaires human. Chaque plasmide exprime une nickase Cas9 D10A et un sgRNA distinct ciblant des brins d'ADN opposés au sein de MMP2. Lorsqu'elles sont dirigées vers des sites adjacents sur des brins d'ADN opposés, les deux nickases génèrent des cassures simple brin décalées qui, ensemble, produisent une cassure double brin décalée, nécessitant une activité coordonnée sur la cible de la part des deux guides. La cassure d'ADN qui en résulte est résolue par les voies de réparation cellulaires endogènes, le plus souvent par jonction non homologue (NHEJ), ce qui conduit à des insertions ou des délétions qui perturbent la fonction de MMP2. En nécessitant l'engagement de deux ARNsg au locus cible, l'approche par double nick améliore la spécificité de l'édition et offre une stratégie CRISPR complémentaire pour les applications où un contrôle supplémentaire de la précision du ciblage est souhaité.

Afin de faciliter l'identification efficace des cellules éditées, un plasmide code pour la GFP permettant la visualisation par fluorescence des populations transfectées, tandis que le plasmide compagnon porte un gène de résistance à la puromycine pour la sélection antibiotique. Ensemble, ces caractéristiques favorisent l'enrichissement efficace des populations co-transfectées et simplifient la validation des clones présentant une perturbation de MMP2.

Réservé à la recherche. N'est pas destiné à un usage diagnostique ou thérapeutique.