MMP-7 Double Nickase Plasmid (m): sc-421677-NIC
- Zielspezies: mouse
- 20 µg transfektionsfertige, aufgereinigte Plasmid DNA; geeignet für 20 Transfektionen
- Das MMP-7 Double Nickase Plasmid (m) wird als Plasmid-Paar geliefert. Die einzelnen Plasmide kodieren für eine D10A mutierte Cas9 Nuklease sowie für je eine unterschiedliche, zielspezifische 20nt guide RNA (gRNA) Sequenz. Dies erlaubt eine hohe Knockout-Effizienz bei gleichzeitig größerer Spezifität als das entsprechende CRISPR/Cas9 KO Plasmid
- gRNA Sequenzpaare liegen ca. 20 bp auseinander um ein spezifisches Cas9-vermitteltes "Double Nicking" der genomischen DNA zu erlauben und so im Resultat den Effekt eines Doppelstrangbruchs nachzuahmen.
- Ein Plasmid kodiert für ein Puromycin-Resistenzgen zur Selektion von stabilen Knockout-Zellen. Das andere Plasmid kodiert für ein GFP-Gen für den visuellen Nachweis der Transfektion
- MMP-7 Double-Nickase-Plasmid (m) und MMP-7 Double-Nickase-Plasmid (m2) kodieren unterschiedliche gepaarte gRNA-Designs, die auf Mmp7 abzielen. Möglicherweise ist eines oder sind beide Designs verfügbar
Bestellinformation
| Produkt | Katalog # | EINHEIT | Preis | ANZAHL | Favoriten | |
MMP-7 Double Nickase Plasmid (m) | sc-421677-NIC | 20 µg | $410.00 | |||
MMP-7 Double Nickase Plasmid (m2) | sc-421677-NIC-2 | 20 µg | $410.00 |
Matrix-Metalloproteinase-7 (MMP-7; Matrilysin), kodiert durch das Mausgen *Mmp7*, ist eine sezernierte, zinkabhängige Endopeptidase, die die extrazelluläre Matrix durch Spaltung von Substraten wie Proteoglykanen, Laminin, Fibronectin und ausgewählten Kollagenen umgestaltet. Über den reinen Matrixumsatz hinaus kann MMP-7 Zelloberflächen- und lösliche Proteine prozessieren und dadurch die Dynamik epithelialer Barrieren, inflammatorische Signalwege sowie die Verfügbarkeit von Wachstumsfaktoren in Gewebemikroumgebungen beeinflussen. Die *Mmp7*-Expression ist häufig mit Programmen des epithelialen Remodelings verbunden und kann mit Signalwegen verknüpft sein, die an Wundheilung, angeborenen Immunantworten und tumorassoziiertem Crosstalk zwischen Stroma und Epithel beteiligt sind. Eine fehlregulierte MMP-7-Aktivität wird oft im Kontext aberranter Gewebeumgestaltung untersucht, einschließlich Modellen entzündlicher Erkrankungen und der Krebsbiologie, bei denen veränderte Proteolyse Invasion und lokale Signalgebung beeinflusst.
MMP-7 Das Double-Nickase-Plasmid (m) besteht aus einem aufeinander abgestimmten Plasmidpaar, das für die hochspezifische Bearbeitung des Mmp7-Lokus in mouse-Zelllinien entwickelt wurde. Jedes Plasmid exprimiert eine Cas9-D10A-Nickase und eine spezifische sgRNA, die auf entgegengesetzte DNA-Stränge innerhalb von Mmp7 abzielt. Wenn sie auf benachbarte Stellen auf entgegengesetzten DNA-Strängen gerichtet sind, erzeugen die beiden Nickasen versetzte Einzelstrang-Schnitte, die zusammen einen versetzten Doppelstrangbruch erzeugen, was eine koordinierte On-Target-Aktivität beider Guides erfordert. Der resultierende DNA-Bruch wird durch endogene zelluläre Reparaturwege behoben, meist durch nicht-homologe Endverknüpfung (NHEJ), was zu Insertionen oder Deletionen führt, die die Mmp7-Funktion stören. Durch die Notwendigkeit einer doppelten sgRNA-Bindung am Zielort erhöht der Doppel-Nick-Ansatz die Spezifität der Bearbeitung und bietet eine komplementäre CRISPR-Strategie für Anwendungen, bei denen eine zusätzliche Kontrolle über die Zielgenauigkeit gewünscht ist.
Um eine effiziente Identifizierung editierter Zellen zu unterstützen, kodiert ein Plasmid GFP zur fluoreszierenden Visualisierung transfizierter Populationen, während das Begleitplasmid ein Puromycin-Resistenzgen für die Antibiotika-Selektion trägt. Zusammen unterstützen diese Merkmale eine effiziente Anreicherung co-transfizierter Populationen und vereinfachen die Validierung von Klonen mit Mmp7-Störung.
Nur für Forschungszwecke. Nicht für diagnostische oder therapeutische Zwecke bestimmt.