Plasmide Double Nickase (h) Meis1: sc-401481-NIC
- Espèces cibles: human
- 20 µg d'ADN plasmidique purifié et prêt à transfecter; Jusqu'à 20 transfections
- Le Plasmide Double Nickase (h) Meis1 correspond à une paire de plasmides chacun codant la nucléase Cas9 mutante D10A et un ARN guide (gARN) cible de 20 nt specifique, élaboré pour le knockout optimal de l'expression d'un gène avec une plus grande spécificité que le plasmide KO CRISPR/Cas9 correspondant.
- Les séquences des paires d'ARNg sont décalées de 20 pb environ pour induire avec la Cas9 une double entaille spécifique de l'ADN génomique, qui imite un DSB
- L'un des plasmides de la paire contient un gène de résistance à la puromycine; l'autre plasmide de la paire contient un marqueur GFP pour confirmer visuellement la transfection
- Le plasmide Meis1 Double Nickase (h) et le plasmide Meis1 Double Nickase (h2) codent pour des paires distinctes de gRNA ciblant MEIS1. Un ou les deux modèles peuvent être disponibles
- Après transfection, l'efficacité de knockout de gène peut être évaluée par WB, IF ou IHC en utilisant l'anticorps: Meis1/2/3 Antibody (9.2.7): sc-101850
Informations pour la commande
| Nom du produit | Ref. Catalogue | COND. | Prix HT | QTÉ | Favoris | |
Plasmide Double Nickase (h) Meis1 | sc-401481-NIC | 20 µg | $410.00 | |||
Plasmide Double Nickase (h2) Meis1 | sc-401481-NIC-2 | 20 µg | $410.00 |
MEIS1 code un facteur de transcription à homéoboîte de classe TALE, qui s’associe aux protéines PBX et HOX pour contrôler des programmes d’expression génique spécifiques de lignée au cours du développement et de l’homéostasie des tissus adultes. Dans les cellules hématopoïétiques, MEIS1 contribue à des réseaux transcriptionnels qui régulent le maintien des cellules souches/progénitrices, le contrôle du cycle cellulaire et la différenciation, et il interagit avec des voies gouvernant l’état de la chromatine et l’activité des enhancers. Une expression dérégulée de MEIS1 ou des perturbations d’enhancers ont été associées à la leucémogenèse, notamment dans les leucémies aiguës avec réarrangement de MLL, où MEIS1 peut coopérer avec les programmes du cluster HOXA. MEIS1 est également impliqué dans des processus cardiovasculaires et neurodéveloppementaux, ce qui en fait un nœud utile pour étudier la régulation transcriptionnelle à travers plusieurs systèmes d’organes.
Meis1 Le plasmide double nickase (h) se compose d'une paire de plasmides appariés, conçus pour une édition hautement spécifique du locus MEIS1 dans les lignées cellulaires human. Chaque plasmide exprime une nickase Cas9 D10A et un sgRNA distinct ciblant des brins d'ADN opposés au sein de MEIS1. Lorsqu'elles sont dirigées vers des sites adjacents sur des brins d'ADN opposés, les deux nickases génèrent des cassures simple brin décalées qui, ensemble, produisent une cassure double brin décalée, nécessitant une activité coordonnée sur la cible de la part des deux guides. La cassure d'ADN qui en résulte est résolue par les voies de réparation cellulaires endogènes, le plus souvent par jonction non homologue (NHEJ), ce qui conduit à des insertions ou des délétions qui perturbent la fonction de MEIS1. En nécessitant l'engagement de deux ARNsg au locus cible, l'approche par double nick améliore la spécificité de l'édition et offre une stratégie CRISPR complémentaire pour les applications où un contrôle supplémentaire de la précision du ciblage est souhaité.
Afin de faciliter l'identification efficace des cellules éditées, un plasmide code pour la GFP permettant la visualisation par fluorescence des populations transfectées, tandis que le plasmide compagnon porte un gène de résistance à la puromycine pour la sélection antibiotique. Ensemble, ces caractéristiques favorisent l'enrichissement efficace des populations co-transfectées et simplifient la validation des clones présentant une perturbation de MEIS1.
Réservé à la recherche. N'est pas destiné à un usage diagnostique ou thérapeutique.