Not CRISPR data: the image illustrates antibody quality for visualizing CRISPR experiment results.
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Plasmide CRISPR/Cas9 KO Med30 (h): sc-406399
- Espèces cibles: human
- 20 µg d'ADN plasmidique purifié et prêt à transfecter; Jusqu'à 20 transfections
- Med30 Le plasmide CRISPR/Cas9 Knockout (KO) (h) est un ensemble de plasmides, chacun codant pour la nucléase Cas9 et un ARN guide (gRNA) de 20 nt spécifique à la cible, conçu pour une efficacité de knockout maximale à l'aide de séquences issues de la bibliothèque GeCKO v2
- Les séquences d'ARN guide (gRNA) dirigent Cas9 pour induire des cassures double brin (DSB) spécifiques au site dans le locus génomique Med30, entraînant un knock-out génique par jonction non homologue (NHEJ)
- Les gènes de résistance à la puromycine et RFP sont flanqués de sites LoxP, permettant la suppression des marqueurs de sélection via la recombinase Cre (Cre Vector : sc-418923) après l'établissement de lignées cellulaires knock-out stables
- Après transfection, l'efficacité de knockout de gène peut être évaluée par WB, IF ou IHC en utilisant l'anticorps: Med30 Antibody (C-6): sc-393289
Informations pour la commande
| Nom du produit | Ref. Catalogue | COND. | Prix HT | QTÉ | Favoris | |
Plasmide CRISPR/Cas9 KO Med30 (h) | sc-406399 | 20 µg | $397.00 |
Présentation
MED30 code une sous-unité centrale du complexe Mediator, qui couple des facteurs de transcription spécifiques de séquence à l’ARN polymérase II, permettant une initiation régulée de la transcription et une expression génique dépendante du promoteur. Med30 contribue à l’intégrité structurale de Mediator et soutient des programmes transcriptionnels coordonnés qui régissent la progression du cycle cellulaire, la différenciation et la signalisation en réponse au stress. Comme Mediator intègre de multiples signaux, toute perturbation de MED30 peut modifier des réseaux transcriptionnels impliqués dans le contrôle de la prolifération et l’homéostasie cellulaire. Un fonctionnement dérégulé de Mediator est fréquemment associé à des états d’expression génique liés aux maladies, ce qui fait de MED30 un nœud utile pour étudier les circuits transcriptionnels dans les cellules humaines.
Le plasmide CRISPR/Cas9 KO Med30 (h) est un ensemble de plasmides conçus pour la disruption ciblée du gène MED30 dans les lignées cellulaires human. Chaque plasmide co-exprime un ARN guide unique (sgRNA) ciblant un site distinct au sein du MED30, ainsi que la nucléase Cas9 de Streptococcus pyogenes. Les plasmides codent également pour la GFP, ce qui permet l'identification par fluorescence et l'enrichissement des cellules transfectées avec succès par microscopie à fluorescence ou cytométrie en flux.
La conception multi-guide augmente la probabilité de générer des insertions ou des délétions (indels) qui perturbent le cadre de lecture ouvert MED30 à la suite de la formation de cassures double brin médiées par Cas9. Les cassures d'ADN introduites par le système CRISPR/Cas9 sont réparées par des voies endogènes de jonction non homologue (NHEJ), ce qui entraîne fréquemment des mutations par décalage du cadre de lecture qui suppriment l'expression de la protéine Med30.
Ce système de knock-out CRISPR permet la génération efficace de modèles cellulaires déficients en MED30 pour l'étude de la signalisation de Med30, les études de génomique fonctionnelle, la recherche en biologie du cancer et l'évaluation des réponses thérapeutiques dans des lignées cellulaires humaines.
Caractéristiques principales
- sgRNA ciblant le ou les exons de MED30 essentiels à la fonction de Med30
Co-expression de SpCas9 et de sgRNA à partir d'un seul plasmide pour une administration simplifiée
Rapporteur GFP pour l'identification des cellules transfectées
Pool de plasmides ciblant plusieurs sites génomiques de MED30 pour améliorer l'efficacité du knock-out
Compatible avec l'administration par transfection
Variantes de conception
CRISPR +/- HDR
- Les gRNA codés par le Med30 plasmide CRISPR/Cas9 KO (h) et le Med30 plasmide CRISPR/Cas9 KO (h2) ciblent des sites distincts au sein du locus MED30. Une ou les deux conceptions de ciblage peuvent être disponibles. Voir les produits associés pour connaître la disponibilité.
Les constructions donneuses HDR codées par le Med30 plasmide HDR (h) et le Med30 (h2) contiennent une cassette de résistance à la puromycine et un rapporteur RFP flanqué de bras d'homologie MED30 pour permettre la réparation dirigée par homologie au niveau de sites cibles MED30 définis correspondant aux conceptions CRISPR/Cas9 KO. La disponibilité des donneurs HDR peut varier. Voir les produits associés pour connaître la disponibilité.
Réservé à la recherche. N'est pas destiné à un usage diagnostique ou thérapeutique.