MARCKSL1 Plásmido CRISPR/Cas9 KO (h): sc-403985

Descripción general

MARCKSL1 (MARCKS-like 1) codifica una proteína asociada a la membrana y capaz de unirse a la actina, que regula la remodelación del citoesqueleto, la forma celular y la motilidad mediante interacciones dependientes de la fosforilación con fosfolípidos y con la red de actina. Participa en procesos vinculados al crecimiento de neuritas, la migración celular y la dinámica de adhesión, integrando señales aguas abajo de quinasas como PKC y de vías que controlan la formación de lamelipodios. La alteración de la expresión de MARCKSL1 se ha asociado con cambios en el comportamiento invasivo y en programas de proliferación en múltiples contextos tumorales, y también se estudia en biología del neurodesarrollo, donde la reorganización de la actina es crucial. Estas propiedades hacen de MARCKSL1 un nodo útil para analizar fenotipos celulares impulsados por actina y el acoplamiento entre la señalización y el citoesqueleto.

El plásmido CRISPR/Cas9 KO MARCKSL1 (h) es un conjunto de plásmidos diseñado para la interrupción dirigida del gen MARCKSL1 en líneas celulares human. Cada plásmido coexpresa un ARN guía único (sgRNA) dirigido a un sitio distinto dentro del MARCKSL1 junto con la nucleasa Cas9 de Streptococcus pyogenes. Los plásmidos también codifican GFP, lo que permite la identificación fluorescente y el enriquecimiento de las células transfectadas con éxito mediante microscopía de fluorescencia o citometría de flujo.

El diseño multiguía aumenta la probabilidad de generar inserciones o deleciones (indeles) que interrumpan el marco de lectura abierto de MARCKSL1 tras la formación de roturas de doble cadena mediadas por Cas9. Las roturas de ADN introducidas por el sistema CRISPR/Cas9 se reparan a través de vías endógenas de unión de extremos no homólogos (NHEJ), lo que con frecuencia da lugar a mutaciones de desplazamiento del marco de lectura que anulan la expresión de la proteína MARCKSL1.

Este sistema de knockout CRISPR permite la generación eficiente de modelos celulares deficientes en MARCKSL1 para la investigación de la señalización de MARCKSL1, estudios de genómica funcional, investigación en biología del cáncer y evaluación de respuestas terapéuticas en líneas celulares humanas.

Características principales

• sgRNA dirigidos a los exones de MARCKSL1 críticos para la función de MARCKSL1
  Coexpresión de SpCas9 y sgRNA a partir de un único plásmido para simplificar la administración
  Reportero GFP para la identificación de células transfectadas
  Conjunto de plásmidos dirigidos a múltiples sitios genómicos de MARCKSL1 para mejorar la eficiencia del knockout
  Compatible con la administración mediante transfección

Variantes de diseño

CRISPRs +/- HDRs

• Los gRNA codificados por el plásmido MARCKSL1 CRISPR/Cas9 KO (h) y el plásmido MARCKSL1 CRISPR/Cas9 KO (h2) se dirigen a sitios distintos dentro del locus MARCKSL1. Puede estar disponible uno o ambos diseños de orientación. Consulte «Productos relacionados» para conocer la disponibilidad.
  Las construcciones donantes HDR codificadas por el plásmido HDR MARCKSL1 (h) y el plásmido HDR MARCKSL1 (h2) contienen un casete de resistencia a la puromicina y un reportero RFP flanqueado por brazos de homología MARCKSL1 para facilitar la reparación dirigida por homología en sitios diana MARCKSL1 definidos que se corresponden con los diseños de KO de CRISPR/Cas9. La disponibilidad de los donantes HDR puede variar. Consulte «Productos relacionados» para conocer la disponibilidad.

Sólo para uso en investigación. No destinado a uso diagnóstico o terapéutico.