MARCKSL1 Plasmídeo CRISPR/Cas9 KO (h): sc-403985

Visão geral

MARCKSL1 (MARCKS-like 1) codifica uma proteína associada à membrana e com capacidade de ligação à actina, que regula a remodelação do citoesqueleto, a forma celular e a motilidade por meio de interações dependentes de fosforilação com fosfolípidos e com a rede de actina. Atua em processos ligados ao crescimento de neuritos, à migração celular e à dinâmica de adesão, integrando sinais a jusante de quinases como a PKC e de vias que controlam a formação de lamelipódios. Alterações na expressão de MARCKSL1 têm sido associadas a mudanças no comportamento invasivo e em programas de proliferação em múltiplos contextos tumorais, e o gene também é estudado em neurobiologia do desenvolvimento, onde a reorganização da actina é crucial. Essas propriedades tornam o MARCKSL1 um ponto útil para dissecar fenótipos celulares impulsionados pela actina e o acoplamento entre sinalização e citoesqueleto.

O Plasmídeo CRISPR/Cas9 KO MARCKSL1 (h) é um conjunto de plasmídeos concebido para a interrupção direcionada do gene MARCKSL1 em linhas celulares human. Cada plasmídeo coexpressa um RNA guia único (sgRNA) direcionado a um local distinto dentro do MARCKSL1, juntamente com a nuclease Cas9 de Streptococcus pyogenes. Os plasmídeos também codificam GFP, permitindo a identificação fluorescente e o enriquecimento de células transfectadas com sucesso por microscopia de fluorescência ou citometria de fluxo.

O design multiguia aumenta a probabilidade de gerar inserções ou deleções (indels) que interrompem o quadro de leitura aberto do MARCKSL1 na sequência da formação de quebras de cadeia dupla mediadas por Cas9. As quebras de ADN introduzidas pelo sistema CRISPR/Cas9 são reparadas através de vias endógenas de junção de extremidades não homólogas (NHEJ), resultando frequentemente em mutações de deslocamento de quadro que abolir a expressão da proteína MARCKSL1.

Este sistema de knockout CRISPR permite a geração eficiente de modelos celulares com deficiência de MARCKSL1 para a investigação da sinalização de MARCKSL1, estudos de genómica funcional, investigação em biologia do cancro e avaliação de respostas terapêuticas em linhas celulares humanas.

Características principais

• sgRNAs direcionados para o(s) exão(ões) MARCKSL1 críticos para a função MARCKSL1
  Coexpressão de SpCas9 e sgRNA a partir de um único plasmídeo para simplificar a administração
  Repórter GFP para identificação de células transfectadas
  Conjunto de plasmídeos direcionados para múltiplos locais genómicos MARCKSL1 para melhorar a eficiência do knockout
  Compatível com administração por transfecção

Variantes de Design

CRISPRs +/- HDRs

• Os gRNAs codificados pelo MARCKSL1 Plasmídeo CRISPR/Cas9 KO (h) e pelo MARCKSL1 Plasmídeo CRISPR/Cas9 KO (h2) têm como alvo locais distintos dentro do locus MARCKSL1. Pode estar disponível um ou ambos os designs de alvo. Consulte Produtos Relacionados para verificar a disponibilidade.
  As construções doadoras HDR codificadas pelo MARCKSL1 Plasmídeo HDR (h) e o Plasmídeo HDR MARCKSL1 (h2) contêm uma cassete de resistência à puromicina e um repórter RFP flanqueado por braços de homologia MARCKSL1 para suportar a reparação dirigida por homologia em locais-alvo MARCKSL1 definidos, correspondentes aos desenhos de KO CRISPR/Cas9. A disponibilidade do doador HDR pode variar. Consulte Produtos Relacionados para verificar a disponibilidade.

Apenas para uso em investigação. Não se destina a uso diagnóstico ou terapêutico.