MAGI-1 CRISPR/Cas9 케이오 플라스미드 (h): sc-402283

개요

MAGI1은 타이트 정션(tight junction)과 기타 세포–세포 접촉 부위에 풍부하게 존재하는 막 연관 구아닐레이트 키나아제(MAGUK) 계열의 스캐폴드 단백질인 MAGI-1을 암호화합니다. MAGI-1은 PDZ 및 WW 도메인을 통해 정션 구성요소와 신호 전달 효과기 단백질에 결합하여 다단백질 신호복합체의 구성을 조직합니다. 이를 통해 상피 세포 극성(epithelial polarity), 부착연접/타이트 정션의 안정성, 그리고 세포골격 재구성과 신호전달에 연관된 경로의 공간적 조절을 조율하는 데 기여합니다. MAGI1의 발현 변화 또는 정션에서의 국소화 이상은 장벽 기능의 붕괴와 비정상적인 세포 이동 프로그램과 연관되어 왔으며, 이러한 과정은 암 생물학 및 염증성 조직 리모델링 연구에서 자주 다루어집니다. 또한 MAGI-1은 정션 구조와 성장인자 반응성 신호 네트워크 간 크로스토크(cross-talk)를 규명하기 위한 분석 노드로도 활용됩니다.

MAGI-1 CRISPR/Cas9 KO 플라스미드 (h)는 human 세포주에서 MAGI1 유전자의 표적 파괴를 위해 설계된 플라스미드 풀입니다. 각 플라스미드는 MAGI1 유전자 내의 서로 다른 부위를 표적으로 하는 고유한 단일 가이드 RNA(sgRNA)와 Streptococcus pyogenes Cas9 뉴클레아제를 함께 발현합니다. 또한 이 플라스미드들은 GFP를 암호화하여, 형광 현미경이나 유세포 분석기를 통해 성공적으로 형질전환된 세포를 형광으로 식별하고 농축할 수 있게 합니다.

다중 가이드 설계는 Cas9에 의한 이중 가닥 절단 형성 후 MAGI1의 개방 독서 틀(ORF)을 파괴하는 삽입 또는 결실(indel)이 발생할 가능성을 높입니다. CRISPR/Cas9 시스템에 의해 유발된 DNA 절단은 내인성 비동종 말단 결합(NHEJ) 경로를 통해 복구되며, 이는 종종 MAGI-1 단백질 발현을 소멸시키는 프레임 시프트 돌연변이를 초래합니다.

이 CRISPR 녹아웃 시스템은 MAGI-1 신호 전달 연구, 기능 유전체학 연구, 암 생물학 연구 및 인간 세포주에서의 치료 반응 평가를 위한 MAGI1 결핍 세포 모델을 효율적으로 생성할 수 있게 합니다.

주요 특징

• MAGI-1 기능에 중요한 MAGI1 엑손을 표적하는 sgRNA
  전달을 단순화하기 위해 단일 플라스미드에서 SpCas9 및 sgRNA의 공동 발현
  형질전환된 세포 식별을 위한 GFP 리포터
  녹아웃 효율 향상을 위해 여러 MAGI1 게놈 부위를 표적하는 플라스미드 풀
  형질전환을 통한 전달과 호환

설계 변형

CRISPRs +/- HDR

• MAGI-1 CRISPR/Cas9 KO 플라스미드 (h) 및 MAGI-1 CRISPR/Cas9 KO 플라스미드 (h2)에 의해 암호화되는 gRNA는 MAGI1 유전자좌 내의 서로 다른 부위를 표적화합니다. 표적화 설계 중 하나 또는 둘 다 이용 가능할 수 있습니다. 구입 가능 여부는 관련 제품을 참조하십시오.
  MAGI-1 HDR 플라스미드 (h) 및 MAGI-1 HDR 플라스미드 (h2)에 의해 암호화되는
  HDR 기증자 컨스트럭트는 푸로마이신 내성 카세트와 RFP 리포터를 포함하며, 이는 CRISPR/Cas9 KO 설계에 해당하는 정의된 MAGI1 표적 부위에서의 상동성 유도 복구를 지원하기 위해 MAGI1 상동성 암으로 둘러싸여 있습니다. HDR 기증자의 재고 여부는 달라질 수 있습니다. 재고 여부는 관련 제품을 참조하십시오.

연구용으로만 사용하세요. 진단 또는 치료용이 아닙니다.