LPLUNC3 Double Nickase Plasmid (h): sc-406344-NIC
- Zielspezies: human
- 20 µg transfektionsfertige, aufgereinigte Plasmid DNA; geeignet für 20 Transfektionen
- Das LPLUNC3 Double Nickase Plasmid (h) wird als Plasmid-Paar geliefert. Die einzelnen Plasmide kodieren für eine D10A mutierte Cas9 Nuklease sowie für je eine unterschiedliche, zielspezifische 20nt guide RNA (gRNA) Sequenz. Dies erlaubt eine hohe Knockout-Effizienz bei gleichzeitig größerer Spezifität als das entsprechende CRISPR/Cas9 KO Plasmid
- gRNA Sequenzpaare liegen ca. 20 bp auseinander um ein spezifisches Cas9-vermitteltes "Double Nicking" der genomischen DNA zu erlauben und so im Resultat den Effekt eines Doppelstrangbruchs nachzuahmen.
- Ein Plasmid kodiert für ein Puromycin-Resistenzgen zur Selektion von stabilen Knockout-Zellen. Das andere Plasmid kodiert für ein GFP-Gen für den visuellen Nachweis der Transfektion
- LPLUNC3 Double-Nickase-Plasmid (h) und LPLUNC3 Double-Nickase-Plasmid (h2) kodieren unterschiedliche gepaarte gRNA-Designs, die auf BPIFB3 abzielen. Möglicherweise ist eines oder sind beide Designs verfügbar
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| Produkt | Katalog # | EINHEIT | Preis | ANZAHL | Favoriten | |
LPLUNC3 Double Nickase Plasmid (h) | sc-406344-NIC | 20 µg | $410.00 |
BPIFB3 kodiert LPLUNC3, ein sekretiertes Protein mit bactericidal/permeability-increasing-(BPI-)Fold, das in mukosalen Epithelien angereichert ist und dort mit der angeborenen Barriereabwehr sowie der Regulation der Oberflächenhomöostase der Atemwege und des oberen aerodigestiven Trakts in Verbindung steht. LPLUNC3 ist mit Programmen der epithelialen Differenzierung und Wirt–Mikroben-Interaktionen assoziiert und könnte entzündliche Signalnetzwerke beeinflussen, die die mukosale Immunität prägen. Eine veränderte Expression von BPIFB3 wurde im Kontext von epithelialem Remodeling und Entzündung beschrieben, was seine Nutzung als molekularen Readout in der Atemwegsbiologie und in infektionsbezogenen Modellen unterstützt. Die funktionelle Untersuchung von BPIFB3 kann dazu beitragen zu klären, wie von Epithelzellen sekretierte Faktoren zur antimikrobiellen Aktivität, zu Schleim-/Sekretionsphänotypen und zum Entzündungstonus beitragen.
LPLUNC3 Das Double-Nickase-Plasmid (h) besteht aus einem aufeinander abgestimmten Plasmidpaar, das für die hochspezifische Bearbeitung des BPIFB3-Lokus in human-Zelllinien entwickelt wurde. Jedes Plasmid exprimiert eine Cas9-D10A-Nickase und eine spezifische sgRNA, die auf entgegengesetzte DNA-Stränge innerhalb von BPIFB3 abzielt. Wenn sie auf benachbarte Stellen auf entgegengesetzten DNA-Strängen gerichtet sind, erzeugen die beiden Nickasen versetzte Einzelstrang-Schnitte, die zusammen einen versetzten Doppelstrangbruch erzeugen, was eine koordinierte On-Target-Aktivität beider Guides erfordert. Der resultierende DNA-Bruch wird durch endogene zelluläre Reparaturwege behoben, meist durch nicht-homologe Endverknüpfung (NHEJ), was zu Insertionen oder Deletionen führt, die die BPIFB3-Funktion stören. Durch die Notwendigkeit einer doppelten sgRNA-Bindung am Zielort erhöht der Doppel-Nick-Ansatz die Spezifität der Bearbeitung und bietet eine komplementäre CRISPR-Strategie für Anwendungen, bei denen eine zusätzliche Kontrolle über die Zielgenauigkeit gewünscht ist.
Um eine effiziente Identifizierung editierter Zellen zu unterstützen, kodiert ein Plasmid GFP zur fluoreszierenden Visualisierung transfizierter Populationen, während das Begleitplasmid ein Puromycin-Resistenzgen für die Antibiotika-Selektion trägt. Zusammen unterstützen diese Merkmale eine effiziente Anreicherung co-transfizierter Populationen und vereinfachen die Validierung von Klonen mit BPIFB3-Störung.
Nur für Forschungszwecke. Nicht für diagnostische oder therapeutische Zwecke bestimmt.