Datos CRISPR no: la imagen ilustra la calidad de los anticuerpos para visualizar los resultados de los experimentos CRISPR.
Datos CRISPR no: la imagen ilustra la calidad de los anticuerpos para visualizar los resultados de los experimentos CRISPR.
LOX Plásmido CRISPR/Cas9 KO (m): sc-421456
- Especies Diana: mouse
- 20 µg de plásmido de ADN purificado listo para la trasfección; suficiente para 20 transfecciones máximo
- LOX El plásmido CRISPR/Cas9 Knockout (KO) (m) es un conjunto de plásmidos, cada uno de los cuales codifica la nucleasa Cas9 y un ARN guía (gRNA) de 20 nt específico para el objetivo, diseñado para lograr la máxima eficiencia de knockout utilizando secuencias derivadas de la biblioteca GeCKO v2
- Las secuencias de gRNA dirigen a Cas9 para que induzca roturas de doble cadena (DSB) específicas en el locus genómico LOX, lo que da lugar a la inactivación del gen mediante unión de extremos no homólogos (NHEJ)
- Los genes de resistencia a la puromicina y RFP están flanqueados por sitios LoxP, lo que permite la eliminación de los marcadores de selección mediante la recombinasa Cre (Vector Cre: sc-418923) tras el establecimiento de líneas celulares knockout estables
- Tras la transfección, la eficacia del knockout puede comprobarse mediante WB, IF ó IHC utilzando el anticuerpo: LOX Anticuerpo (F-8): sc-373995
Información sobre pedidos
| Nombre del producto | Número de catálogo | UNIDAD | Precio | CANTIDAD | Favoritos | |
LOX Plásmido CRISPR/Cas9 KO (m) | sc-421456 | 20 µg | $397.00 |
Descripción general
El gen **Lox** de ratón codifica la lisil oxidasa (LOX), una amina oxidasa secretada dependiente de cobre que cataliza el entrecruzamiento covalente del colágeno y la elastina, controlando así la maduración de la matriz extracelular y la integridad biomecánica de los tejidos. La actividad de LOX modula la remodelación de la MEC, regula la adhesión y la migración célula–matriz, e influye en circuitos de señalización vinculados a la fibrosis y la mecanotransducción, incluidas las vías de integrina/FAK y las MAPK aguas abajo. La expresión o actividad desregulada de LOX se asocia con el endurecimiento y la remodelación anómalos de la matriz observados en trastornos fibróticos, patología vascular y cambios del estroma asociados a tumores, lo que convierte a **Lox** en un nodo útil para estudiar fenotipos impulsados por el microambiente.
El plásmido CRISPR/Cas9 KO LOX (m) es un conjunto de plásmidos diseñado para la interrupción dirigida del gen Lox en líneas celulares mouse. Cada plásmido coexpresa un ARN guía único (sgRNA) dirigido a un sitio distinto dentro del Lox junto con la nucleasa Cas9 de Streptococcus pyogenes. Los plásmidos también codifican GFP, lo que permite la identificación fluorescente y el enriquecimiento de las células transfectadas con éxito mediante microscopía de fluorescencia o citometría de flujo.
El diseño multiguía aumenta la probabilidad de generar inserciones o deleciones (indeles) que interrumpan el marco de lectura abierto de Lox tras la formación de roturas de doble cadena mediadas por Cas9. Las roturas de ADN introducidas por el sistema CRISPR/Cas9 se reparan a través de vías endógenas de unión de extremos no homólogos (NHEJ), lo que con frecuencia da lugar a mutaciones de desplazamiento del marco de lectura que anulan la expresión de la proteína LOX.
Este sistema de knockout CRISPR permite la generación eficiente de modelos celulares deficientes en Lox para la investigación de la señalización de LOX, estudios de genómica funcional, investigación en biología del cáncer y evaluación de respuestas terapéuticas en líneas celulares humanas.
Características principales
- sgRNA dirigidos a los exones de Lox críticos para la función de LOX
Coexpresión de SpCas9 y sgRNA a partir de un único plásmido para simplificar la administración
Reportero GFP para la identificación de células transfectadas
Conjunto de plásmidos dirigidos a múltiples sitios genómicos de Lox para mejorar la eficiencia del knockout
Compatible con la administración mediante transfección
Variantes de diseño
CRISPRs +/- HDRs
- Los gRNA codificados por el plásmido LOX CRISPR/Cas9 KO (m) y el plásmido LOX CRISPR/Cas9 KO (m2) se dirigen a sitios distintos dentro del locus Lox. Puede estar disponible uno o ambos diseños de orientación. Consulte «Productos relacionados» para conocer la disponibilidad.
Las construcciones donantes HDR codificadas por el plásmido HDR LOX (m) y el plásmido HDR LOX (m2) contienen un casete de resistencia a la puromicina y un reportero RFP flanqueado por brazos de homología Lox para facilitar la reparación dirigida por homología en sitios diana Lox definidos que se corresponden con los diseños de KO de CRISPR/Cas9. La disponibilidad de los donantes HDR puede variar. Consulte «Productos relacionados» para conocer la disponibilidad.
Sólo para uso en investigación. No destinado a uso diagnóstico o terapéutico.