Limd1 CRISPR/Cas9 케이오 플라스미드 (m): sc-424343

개요

LIM 도메인 함유 단백질 1(LIM domain containing 1, Limd1)은 포컬 어드히전(focal adhesion)과 세포–세포 접합부에 국소화되는 스캐폴딩 단백질로, 세포골격의 조직화와 기계적 신호전달(mechanotransduction)을 형성하는 단백질–단백질 상호작용을 조율합니다. Limd1은 세포 부착, 이동, 성장 조절을 관장하는 경로에 관여하며, LATS 활성과 YAP/TAZ의 세포 내 위치에 영향을 주는 상호작용을 통해 Hippo/YAP 신호전달의 조절과도 연관된 것으로 보고되었습니다. 마우스 시스템에서 Limd1은 부착 의존적 신호가 중요한 조직 항상성과 발달 프로그램을 연구하는 데 활용됩니다. LIMD1 관련 네트워크의 조절 이상은 종양 억제 생물학 및 전이 관련 표현형과 연관되며, 침윤 변화 및 상피–중간엽 전이(EMT) 유사 과정 등을 포함합니다.

Limd1 CRISPR/Cas9 KO 플라스미드 (m)는 mouse 세포주에서 Limd1 유전자의 표적 파괴를 위해 설계된 플라스미드 풀입니다. 각 플라스미드는 Limd1 유전자 내의 서로 다른 부위를 표적으로 하는 고유한 단일 가이드 RNA(sgRNA)와 Streptococcus pyogenes Cas9 뉴클레아제를 함께 발현합니다. 또한 이 플라스미드들은 GFP를 암호화하여, 형광 현미경이나 유세포 분석기를 통해 성공적으로 형질전환된 세포를 형광으로 식별하고 농축할 수 있게 합니다.

다중 가이드 설계는 Cas9에 의한 이중 가닥 절단 형성 후 Limd1의 개방 독서 틀(ORF)을 파괴하는 삽입 또는 결실(indel)이 발생할 가능성을 높입니다. CRISPR/Cas9 시스템에 의해 유발된 DNA 절단은 내인성 비동종 말단 결합(NHEJ) 경로를 통해 복구되며, 이는 종종 Limd1 단백질 발현을 소멸시키는 프레임 시프트 돌연변이를 초래합니다.

이 CRISPR 녹아웃 시스템은 Limd1 신호 전달 연구, 기능 유전체학 연구, 암 생물학 연구 및 인간 세포주에서의 치료 반응 평가를 위한 Limd1 결핍 세포 모델을 효율적으로 생성할 수 있게 합니다.

주요 특징

• Limd1 기능에 중요한 Limd1 엑손을 표적하는 sgRNA
  전달을 단순화하기 위해 단일 플라스미드에서 SpCas9 및 sgRNA의 공동 발현
  형질전환된 세포 식별을 위한 GFP 리포터
  녹아웃 효율 향상을 위해 여러 Limd1 게놈 부위를 표적하는 플라스미드 풀
  형질전환을 통한 전달과 호환

설계 변형

CRISPRs +/- HDR

• Limd1 CRISPR/Cas9 KO 플라스미드 (m) 및 Limd1 CRISPR/Cas9 KO 플라스미드 (m2)에 의해 암호화되는 gRNA는 Limd1 유전자좌 내의 서로 다른 부위를 표적화합니다. 표적화 설계 중 하나 또는 둘 다 이용 가능할 수 있습니다. 구입 가능 여부는 관련 제품을 참조하십시오.
  Limd1 HDR 플라스미드 (m) 및 Limd1 HDR 플라스미드 (m2)에 의해 암호화되는
  HDR 기증자 컨스트럭트는 푸로마이신 내성 카세트와 RFP 리포터를 포함하며, 이는 CRISPR/Cas9 KO 설계에 해당하는 정의된 Limd1 표적 부위에서의 상동성 유도 복구를 지원하기 위해 Limd1 상동성 암으로 둘러싸여 있습니다. HDR 기증자의 재고 여부는 달라질 수 있습니다. 재고 여부는 관련 제품을 참조하십시오.

연구용으로만 사용하세요. 진단 또는 치료용이 아닙니다.