LHX3 CRISPR/Cas9 케이오 플라스미드 (h): sc-404482

개요

LHX3(LIM homeobox 3)는 배아 발생 동안 계통(라인리지) 결정과 최종 분화 프로그램을 조율하는 LIM 도메인-홈도메인 전사인자를 암호화합니다. 뇌하수체와 신경계에서 LHX3는 서열 특이적 DNA 결합과 보조인자(cofactor) 모집을 통해 호르몬 생성 세포의 운명과 운동신경 발달을 제어하는 전사 네트워크를 조절합니다. LHX3 의존적 유전자 조절이 교란되면 전엽 뇌하수체 기관형성과 신경 연결성을 관장하는 발달 경로가 영향을 받습니다. 인간 유전학적 근거는 LHX3 기능 변화가 다양한 신경발달 표현형을 동반할 수 있는 복합 뇌하수체 호르몬 결핍과 연관됨을 보여주며, LHX3는 발달 전사 조절을 연구하는 데 유용한 핵심 노드입니다.

LHX3 CRISPR/Cas9 KO 플라스미드 (h)는 human 세포주에서 LHX3 유전자의 표적 파괴를 위해 설계된 플라스미드 풀입니다. 각 플라스미드는 LHX3 유전자 내의 서로 다른 부위를 표적으로 하는 고유한 단일 가이드 RNA(sgRNA)와 Streptococcus pyogenes Cas9 뉴클레아제를 함께 발현합니다. 또한 이 플라스미드들은 GFP를 암호화하여, 형광 현미경이나 유세포 분석기를 통해 성공적으로 형질전환된 세포를 형광으로 식별하고 농축할 수 있게 합니다.

다중 가이드 설계는 Cas9에 의한 이중 가닥 절단 형성 후 LHX3의 개방 독서 틀(ORF)을 파괴하는 삽입 또는 결실(indel)이 발생할 가능성을 높입니다. CRISPR/Cas9 시스템에 의해 유발된 DNA 절단은 내인성 비동종 말단 결합(NHEJ) 경로를 통해 복구되며, 이는 종종 LHX3 단백질 발현을 소멸시키는 프레임 시프트 돌연변이를 초래합니다.

이 CRISPR 녹아웃 시스템은 LHX3 신호 전달 연구, 기능 유전체학 연구, 암 생물학 연구 및 인간 세포주에서의 치료 반응 평가를 위한 LHX3 결핍 세포 모델을 효율적으로 생성할 수 있게 합니다.

주요 특징

• LHX3 기능에 중요한 LHX3 엑손을 표적하는 sgRNA
  전달을 단순화하기 위해 단일 플라스미드에서 SpCas9 및 sgRNA의 공동 발현
  형질전환된 세포 식별을 위한 GFP 리포터
  녹아웃 효율 향상을 위해 여러 LHX3 게놈 부위를 표적하는 플라스미드 풀
  형질전환을 통한 전달과 호환

설계 변형

CRISPRs +/- HDR

• LHX3 CRISPR/Cas9 KO 플라스미드 (h) 및 LHX3 CRISPR/Cas9 KO 플라스미드 (h2)에 의해 암호화되는 gRNA는 LHX3 유전자좌 내의 서로 다른 부위를 표적화합니다. 표적화 설계 중 하나 또는 둘 다 이용 가능할 수 있습니다. 구입 가능 여부는 관련 제품을 참조하십시오.
  LHX3 HDR 플라스미드 (h) 및 LHX3 HDR 플라스미드 (h2)에 의해 암호화되는
  HDR 기증자 컨스트럭트는 푸로마이신 내성 카세트와 RFP 리포터를 포함하며, 이는 CRISPR/Cas9 KO 설계에 해당하는 정의된 LHX3 표적 부위에서의 상동성 유도 복구를 지원하기 위해 LHX3 상동성 암으로 둘러싸여 있습니다. HDR 기증자의 재고 여부는 달라질 수 있습니다. 재고 여부는 관련 제품을 참조하십시오.

연구용으로만 사용하세요. 진단 또는 치료용이 아닙니다.