leupaxin Double Nickase Plasmid (m): sc-430706-NIC
- Zielspezies: mouse
- 20 µg transfektionsfertige, aufgereinigte Plasmid DNA; geeignet für 20 Transfektionen
- Das leupaxin Double Nickase Plasmid (m) wird als Plasmid-Paar geliefert. Die einzelnen Plasmide kodieren für eine D10A mutierte Cas9 Nuklease sowie für je eine unterschiedliche, zielspezifische 20nt guide RNA (gRNA) Sequenz. Dies erlaubt eine hohe Knockout-Effizienz bei gleichzeitig größerer Spezifität als das entsprechende CRISPR/Cas9 KO Plasmid
- gRNA Sequenzpaare liegen ca. 20 bp auseinander um ein spezifisches Cas9-vermitteltes "Double Nicking" der genomischen DNA zu erlauben und so im Resultat den Effekt eines Doppelstrangbruchs nachzuahmen.
- Ein Plasmid kodiert für ein Puromycin-Resistenzgen zur Selektion von stabilen Knockout-Zellen. Das andere Plasmid kodiert für ein GFP-Gen für den visuellen Nachweis der Transfektion
- leupaxin Double-Nickase-Plasmid (m) und leupaxin Double-Nickase-Plasmid (m2) kodieren unterschiedliche gepaarte gRNA-Designs, die auf Lpxn abzielen. Möglicherweise ist eines oder sind beide Designs verfügbar
Bestellinformation
| Produkt | Katalog # | EINHEIT | Preis | ANZAHL | Favoriten | |
leupaxin Double Nickase Plasmid (m) | sc-430706-NIC | 20 µg | $410.00 | |||
leupaxin Double Nickase Plasmid (m2) | sc-430706-NIC-2 | 20 µg | $410.00 |
Das murine Gen **Lpxn** kodiert **Leupaxin**, ein fokaler Adhäsionsadapter aus der Paxillin-Familie, der integrinabhängige Signalübertragung und den Umbau des Aktin-Zytoskeletts koordiniert. Leupaxin lokalisiert an Adhäsionskomplexe und interagiert mit Kinasen sowie Gerüstproteinen, um Zellspreitung, Migration und Mechanotransduktion zu beeinflussen, indem es Signale aus der extrazellulären Matrix in nachgeschaltete Signalwege wie die Fokaladhäsions-Signalgebung und die durch Rho‑GTPasen regulierte Dynamik integriert. In immunologischen und stromalen Kontexten kann eine veränderte Leupaxin-Aktivität adhäsionsabhängige Aktivierungszustände und Programme des Gewebeumbaus modulieren, wodurch **Lpxn** ein nützlicher Knotenpunkt zur Untersuchung entzündlicher Mikroumgebungen und von Zellmotilitäts-Phänotypen ist, die für die Krebsbiologie sowie für vaskulären oder fibrotischen Umbau relevant sind.
leupaxin Das Double-Nickase-Plasmid (m) besteht aus einem aufeinander abgestimmten Plasmidpaar, das für die hochspezifische Bearbeitung des Lpxn-Lokus in mouse-Zelllinien entwickelt wurde. Jedes Plasmid exprimiert eine Cas9-D10A-Nickase und eine spezifische sgRNA, die auf entgegengesetzte DNA-Stränge innerhalb von Lpxn abzielt. Wenn sie auf benachbarte Stellen auf entgegengesetzten DNA-Strängen gerichtet sind, erzeugen die beiden Nickasen versetzte Einzelstrang-Schnitte, die zusammen einen versetzten Doppelstrangbruch erzeugen, was eine koordinierte On-Target-Aktivität beider Guides erfordert. Der resultierende DNA-Bruch wird durch endogene zelluläre Reparaturwege behoben, meist durch nicht-homologe Endverknüpfung (NHEJ), was zu Insertionen oder Deletionen führt, die die Lpxn-Funktion stören. Durch die Notwendigkeit einer doppelten sgRNA-Bindung am Zielort erhöht der Doppel-Nick-Ansatz die Spezifität der Bearbeitung und bietet eine komplementäre CRISPR-Strategie für Anwendungen, bei denen eine zusätzliche Kontrolle über die Zielgenauigkeit gewünscht ist.
Um eine effiziente Identifizierung editierter Zellen zu unterstützen, kodiert ein Plasmid GFP zur fluoreszierenden Visualisierung transfizierter Populationen, während das Begleitplasmid ein Puromycin-Resistenzgen für die Antibiotika-Selektion trägt. Zusammen unterstützen diese Merkmale eine effiziente Anreicherung co-transfizierter Populationen und vereinfachen die Validierung von Klonen mit Lpxn-Störung.
Nur für Forschungszwecke. Nicht für diagnostische oder therapeutische Zwecke bestimmt.