Partículas Lentivirales de Activación (h) Laminin γ-2: sc-401068-LAC

LAMC2 codifica la cadena γ2 de laminina, un componente clave de la laminina-332 en las membranas basales, que sostiene la adhesión epitelial, la polaridad y la integridad tisular. Mediante interacciones con integrinas como α3β1 y α6β4, la laminina γ2 contribuye a la señalización de adhesiones focales, a la organización de los hemidesmosomas y a vías posteriores, incluidas FAK/Src, PI3K–AKT y MAPK, que regulan la migración y la supervivencia. El procesamiento proteolítico de la laminina-332 puede generar fragmentos que promueven la motilidad, vinculando LAMC2 con la remodelación dinámica de la matriz extracelular durante la reparación de heridas. La expresión desregulada de LAMC2 y el ensamblaje alterado de la laminina-332 se estudian con frecuencia en defectos de la barrera epitelial y en programas de invasión asociados a tumores como biomarcadores de la disrupción de la membrana basal.

Las partículas de activación lentiviral Laminin γ-2 (h) responden a esta necesidad al empaquetar el sistema completo de activación transcripcional del mediador de activación sinérgica (SAM) en partículas lentivirales de alto título listas para la transducción, lo que permite una regulación al alza eficiente de LAMC2 en una gama más amplia de tipos de células humanas.

Las partículas de activación lentiviral Laminin γ-2 (h) suministran todos los componentes funcionales del sistema mediador de activación sinérgica (SAM) a través de la transducción lentiviral. El sistema comprende tres preparaciones de partículas cotransducidas en las células diana: una que codifica dCas9 catalíticamente inactivo (mutaciones D10A y N863A) fusionado al dominio de transactivación VP64 con un gen de resistencia a la blasticidina; otra que codifica la proteína de fusión MS2-p65-HSF1 con un gen de resistencia a la higromicina; y otra que codifica un ARN guía (sgRNA) específico del objetivo de 20 nt fusionado a dos aptámeros de ARN MS2 con un gen de resistencia a la puromicina. Tras la transducción lentiviral y la integración genómica de los casetes de expresión, los componentes del SAM se expresan de forma estable y se ensamblan en el locus diana dentro de la región promotora proximal, aguas arriba del sitio de inicio de la transcripción LAMC2, donde VP64, p65 y HSF1 actúan de forma cooperativa para reclutar la maquinaria transcripcional endógena e impulsar la regulación al alza sostenida de la expresión endógena de Laminin γ-2. El uso de dCas9 inactivo frente a nucleasas evita la introducción de roturas de ADN de doble cadena y preserva el locus genómico nativo LAMC2 y la arquitectura reguladora.

El formato lentiviral ofrece varias ventajas prácticas: la integración genómica estable permite la activación hereditaria a lo largo de las divisiones celulares; las preparaciones de partículas de alto título eliminan la necesidad de producir el virus internamente; y la compatibilidad con tipos de células primarias, no divisibles y resistentes a la transfección amplía la accesibilidad experimental. La transducción exitosa puede confirmarse y enriquecerse mediante selección con triple antibiótico utilizando puromicina, higromicina y blasticidina.

Sólo para uso en investigación. No destinado a uso diagnóstico o terapéutico.