Plásmido Doble Nickase (m) KY peptidase: sc-421366-NIC
- Especies Diana: mouse
- 20 µg de plásmido de ADN purificado listo para la trasfección; suficiente para 20 transfecciones máximo
- El Plásmido Double Nickase (m)KY peptidase consisten en un par de plásmidos cada uno codificando una nucleasa Cas9 mutada D10A y una guia de ARN de 20 nucleótidos (gRNA) diseñados para una mayor especificidad que el homologo CRISPR/Cas9 KO
- Las secuencias de gRNA tienen una diferencia de unas 20 pb para permitir un corte doble mediado por Cas9 en el ADN que imita el doble corte
- Uno de los plásmidos contiene el gen de resistencia a puromicina para la selección y el otro el marcado GFP para confirmar visualmente la transfección
- El plásmido de doble nickasa KY peptidase (m) y el plásmido de doble nickasa KY peptidase (m2) codifican diseños distintos de pares de gRNA dirigidos a Ky. Puede que esté disponible uno o ambos diseños
Información sobre pedidos
| Nombre del producto | Número de catálogo | UNIDAD | Precio | CANTIDAD | Favoritos | |
Plásmido Doble Nickase (m) KY peptidase | sc-421366-NIC | 20 µg | $410.00 | |||
Plásmido Doble Nickase (m2) KY peptidase | sc-421366-NIC-2 | 20 µg | $410.00 |
Ky codifica la peptidasa KY, una proteína enriquecida en el músculo implicada en el mantenimiento de la integridad del músculo esquelético y de la organización sarcomérica, con funciones en la proteostasis y en la remodelación estructural durante el estrés de las miofibras. En ratón, la actividad de la peptidasa KY se vincula a vías que regulan el mantenimiento y el recambio de las miofibrillas, lo que favorece una función contráctil normal y la resistencia al daño. La alteración de Ky se ha asociado con fenotipos neuromusculares compatibles con una patología similar a la distrofia muscular, lo que lo convierte en un gen útil para estudiar los mecanismos de las miopatías. Por tanto, la peptidasa KY es relevante para la investigación sobre degeneración muscular, regeneración y redes de control de calidad de proteínas en tejido estriado.
KY peptidase El plásmido de doble nicasa (m) consiste en un par de plásmidos emparejados diseñados para la edición de alta especificidad del locus Ky en líneas celulares mouse. Cada plásmido expresa una nicasa Cas9 D10A y un ARN guía específico (sgRNA) dirigido a cadenas de ADN opuestas dentro de Ky. Cuando se dirigen a sitios adyacentes en cadenas de ADN opuestas, las dos nicasas generan cortes en cadena simple desplazados que, juntos, producen una rotura de doble cadena escalonada, lo que requiere una actividad coordinada sobre el objetivo por parte de ambas guías. La rotura de ADN resultante se resuelve mediante vías de reparación celular endógenas, más comúnmente a través de la unión de extremos no homólogos (NHEJ), lo que da lugar a inserciones o deleciones que alteran la función de Ky. Al requerir la participación de dos ARN guía en el locus diana, el enfoque de doble corte mejora la especificidad de la edición y proporciona una estrategia CRISPR complementaria para aplicaciones en las que se desea un control adicional sobre la precisión de la orientación.
Para facilitar la identificación eficiente de las células editadas, un plásmido codifica GFP para la visualización fluorescente de las poblaciones transfectadas, mientras que el plásmido complementario lleva un gen de resistencia a la puromicina para la selección con antibióticos. En conjunto, estas características facilitan el enriquecimiento eficiente de las poblaciones cotransfectadas y simplifican la validación de los clones con Ky alterado.
Sólo para uso en investigación. No destinado a uso diagnóstico o terapéutico.