KV1.2 Plasmídeo duplo de Nickase (h): sc-403828-NIC
- alvos específicos: human
- 20 µg de plasmídeo de DNA pronto para transfecção; Suficiente para até 20 transfecções
- KV1.2O plasmídeo de dupla Nickase (h) consiste num par de plasmídeos cada um contem D10A com mutação na nuclease Cas9 nuclease e um alvo especifico de RNA guia com 20 na (gRNA), criado para nocautear a expressão genética com maior especificidade do que o seu correspondente CRISPR/Cas9 KO
- Sequencias pareadas de gRNA são de aproximadamente 20 bp para permitir que os cortes duplos no DNA genômico mediados pela Casp ocorram com especificidade , o que se assemelha ao corte pela DSB
- Cada plasmídeo pertencente ao par de plasmídeos contem um gene de resistência a puromicina para seleção; o outro plasmídeo do par contem um marcador de GFP para a visualização e confirmação da transfecção
- O Plasmídeo Double Nickase KV1.2 (h) e o Plasmídeo Double Nickase KV1.2 (h2) codificam designs distintos de pares de gRNA direcionados para KCNA2. Um ou ambos os desenhos podem estar disponíveis
Informacoes sobre ordens
| Nome do Produto | Numero de Catalogo | UNID | Preco | Qde | FAVORITOS | |
KV1.2 Plasmídeo duplo de Nickase (h) | sc-403828-NIC | 20 µg | $410.00 | |||
KV1.2 Plasmídeo duplo de Nickase (h2) | sc-403828-NIC-2 | 20 µg | $410.00 |
KCNA2 codifica a subunidade Kv1.2 de um canal de potássio dependente de voltagem, um determinante essencial da repolarização da membrana e do molde do potencial de ação em células excitáveis. A Kv1.2 contribui para correntes de K+ do tipo retificador tardio, que regulam a frequência de disparo neuronal, a excitabilidade axonal e a transmissão sináptica, influenciando oscilações de rede e a sinalização dependente de atividade. Ao controlar o potencial de membrana, a Kv1.2 também modula indiretamente a entrada de cálcio e vias a jusante ligadas à liberação de neurotransmissores e à homeostase da excitabilidade. Variação genética ou disfunção em KCNA2 está associada a fenótipos neurológicos, tornando-o um alvo relevante para estudos mecanísticos da regulação de canais iónicos e da biologia de doenças relacionadas com a excitabilidade.
KV1.2 O Plasmídeo de Nickase Dupla (h) consiste num par de plasmídeos combinados, concebidos para a edição de alta especificidade do locus KCNA2 em linhas celulares human. Cada plasmídeo expressa uma nickase Cas9 D10A e um sgRNA distinto que tem como alvo cadeias de ADN opostas dentro de KCNA2. Quando direcionadas para locais adjacentes em cadeias de ADN opostas, as duas nickases geram cortes deslocados numa única cadeia que, em conjunto, produzem uma quebra escalonada de cadeia dupla, exigindo uma atividade coordenada no alvo por parte de ambas as guias. A quebra de ADN resultante é resolvida por vias de reparação celular endógenas, mais frequentemente através da junção de extremidades não homólogas (NHEJ), levando a inserções ou deleções que perturbam a função KCNA2. Ao exigir o envolvimento de dois sgRNA no locus alvo, a abordagem de dupla nickase aumenta a especificidade da edição e fornece uma estratégia CRISPR complementar para aplicações em que se deseja um controlo adicional sobre a precisão do direcionamento.
Para apoiar a identificação eficiente das células editadas, um plasmídeo codifica GFP para visualização fluorescente das populações transfectadas, enquanto o plasmídeo complementar transporta um gene de resistência à puromicina para seleção antibiótica. Em conjunto, estas características apoiam o enriquecimento eficiente das populações co-transfectadas e simplificam a validação dos clones com KCNA2 interrompido.
Apenas para uso em investigação. Não se destina a uso diagnóstico ou terapêutico.