Partículas Lentivirales de Activación (h) Klotho: sc-400970-LAC

El gen humano **KL** codifica **Klotho**, una proteína de membrana de tipo I de paso único que también existe como un ectodominio soluble y actúa como un modulador clave de la señalización del factor de crecimiento de fibroblastos y del metabolismo mineral sistémico. Como correceptor obligatorio de **FGF23**, Klotho influye en la homeostasis del fosfato y de la vitamina D y determina las salidas posteriores de las vías **MAPK/ERK** y **PI3K/AKT** en los tejidos sensibles. Además, Klotho se ha relacionado con la regulación de las respuestas al estrés oxidativo, la señalización **Wnt** y programas de senescencia celular que afectan la remodelación tisular y la homeostasis metabólica. La alteración de la expresión de **KL** se ha asociado con fenotipos relevantes para la disfunción renal, la calcificación vascular y procesos cardiometabólicos y neurodegenerativos relacionados con la edad, lo que respalda su uso como un nodo mecanístico en modelos de investigación centrados en vías.

Las partículas de activación lentiviral Klotho (h) responden a esta necesidad al empaquetar el sistema completo de activación transcripcional del mediador de activación sinérgica (SAM) en partículas lentivirales de alto título listas para la transducción, lo que permite una regulación al alza eficiente de KL en una gama más amplia de tipos de células humanas.

Las partículas de activación lentiviral Klotho (h) suministran todos los componentes funcionales del sistema mediador de activación sinérgica (SAM) a través de la transducción lentiviral. El sistema comprende tres preparaciones de partículas cotransducidas en las células diana: una que codifica dCas9 catalíticamente inactivo (mutaciones D10A y N863A) fusionado al dominio de transactivación VP64 con un gen de resistencia a la blasticidina; otra que codifica la proteína de fusión MS2-p65-HSF1 con un gen de resistencia a la higromicina; y otra que codifica un ARN guía (sgRNA) específico del objetivo de 20 nt fusionado a dos aptámeros de ARN MS2 con un gen de resistencia a la puromicina. Tras la transducción lentiviral y la integración genómica de los casetes de expresión, los componentes del SAM se expresan de forma estable y se ensamblan en el locus diana dentro de la región promotora proximal, aguas arriba del sitio de inicio de la transcripción KL, donde VP64, p65 y HSF1 actúan de forma cooperativa para reclutar la maquinaria transcripcional endógena e impulsar la regulación al alza sostenida de la expresión endógena de Klotho. El uso de dCas9 inactivo frente a nucleasas evita la introducción de roturas de ADN de doble cadena y preserva el locus genómico nativo KL y la arquitectura reguladora.

El formato lentiviral ofrece varias ventajas prácticas: la integración genómica estable permite la activación hereditaria a lo largo de las divisiones celulares; las preparaciones de partículas de alto título eliminan la necesidad de producir el virus internamente; y la compatibilidad con tipos de células primarias, no divisibles y resistentes a la transfección amplía la accesibilidad experimental. La transducción exitosa puede confirmarse y enriquecerse mediante selección con triple antibiótico utilizando puromicina, higromicina y blasticidina.

Sólo para uso en investigación. No destinado a uso diagnóstico o terapéutico.