Keratin 6B Plasmídeo CRISPR/Cas9 KO (m): sc-421355
- alvos específicos: mouse
- 20 µg de plasmídeo de DNA pronto para transfecção; Suficiente para até 20 transfecções
- Keratin 6B O Plasmídeo CRISPR/Cas9 Knockout (KO) (m) é um conjunto de plasmídeos, cada um codificando a nuclease Cas9 e um RNA guia (gRNA) de 20 nt específico para o alvo, concebido para uma eficiência máxima de knockout utilizando sequências derivadas da biblioteca GeCKO v2
- As sequências de gRNA direcionam a Cas9 para induzir quebras de cadeia dupla (DSBs) específicas do local no locus genómico Keratin 6B, resultando no knockout do gene através da junção de extremidades não homólogas (NHEJ)
- Os genes de resistência à puromicina e RFP são flanqueados por sítios LoxP, permitindo a remoção de marcadores de seleção através da recombinase Cre (Cre Vector: sc-418923) após o estabelecimento de linhas celulares knockout estáveis
Informacoes sobre ordens
| Nome do Produto | Numero de Catalogo | UNID | Preco | Qde | FAVORITOS | |
Keratin 6B Plasmídeo CRISPR/Cas9 KO (m) | sc-421355 | 20 µg | $397.00 |
Visão geral
Krt6b codifica a queratina 6B, uma proteína de filamento intermediário do tipo II que se associa a queratinas do tipo I para construir a rede do citoesqueleto de epitélios estratificados. A queratina 6B contribui para a resistência mecânica, a remodelação epitelial e programas induzidos por estresse que acompanham o reparo de feridas e estados de hiperproliferação, atuando em coordenação com processos de diferenciação e de organização do citoesqueleto. Na pele de camundongos e em apêndices relacionados, a expressão de Krt6b é induzida durante lesão e inflamação, conectando a dinâmica dos filamentos de queratina à função de barreira e à homeostase tecidual. A desregulação das redes de queratina está associada à fragilidade epitelial e a fenótipos aberrantes de queratinização, tornando Krt6b um ponto útil para o estudo de respostas ao estresse dependentes de queratina.
O Plasmídeo CRISPR/Cas9 KO Keratin 6B (m) é um conjunto de plasmídeos concebido para a interrupção direcionada do gene Krt6b em linhas celulares mouse. Cada plasmídeo coexpressa um RNA guia único (sgRNA) direcionado a um local distinto dentro do Krt6b, juntamente com a nuclease Cas9 de Streptococcus pyogenes. Os plasmídeos também codificam GFP, permitindo a identificação fluorescente e o enriquecimento de células transfectadas com sucesso por microscopia de fluorescência ou citometria de fluxo.
O design multiguia aumenta a probabilidade de gerar inserções ou deleções (indels) que interrompem o quadro de leitura aberto do Krt6b na sequência da formação de quebras de cadeia dupla mediadas por Cas9. As quebras de ADN introduzidas pelo sistema CRISPR/Cas9 são reparadas através de vias endógenas de junção de extremidades não homólogas (NHEJ), resultando frequentemente em mutações de deslocamento de quadro que abolir a expressão da proteína Keratin 6B.
Este sistema de knockout CRISPR permite a geração eficiente de modelos celulares com deficiência de Krt6b para a investigação da sinalização de Keratin 6B, estudos de genómica funcional, investigação em biologia do cancro e avaliação de respostas terapêuticas em linhas celulares humanas.
Características principais
- sgRNAs direcionados para o(s) exão(ões) Krt6b críticos para a função Keratin 6B
Coexpressão de SpCas9 e sgRNA a partir de um único plasmídeo para simplificar a administração
Repórter GFP para identificação de células transfectadas
Conjunto de plasmídeos direcionados para múltiplos locais genómicos Krt6b para melhorar a eficiência do knockout
Compatível com administração por transfecção
Variantes de Design
CRISPRs +/- HDRs
- Os gRNAs codificados pelo Keratin 6B Plasmídeo CRISPR/Cas9 KO (m) e pelo Keratin 6B Plasmídeo CRISPR/Cas9 KO (m2) têm como alvo locais distintos dentro do locus Krt6b. Pode estar disponível um ou ambos os designs de alvo. Consulte Produtos Relacionados para verificar a disponibilidade.
As construções doadoras HDR codificadas pelo Keratin 6B Plasmídeo HDR (m) e o Plasmídeo HDR Keratin 6B (m2) contêm uma cassete de resistência à puromicina e um repórter RFP flanqueado por braços de homologia Krt6b para suportar a reparação dirigida por homologia em locais-alvo Krt6b definidos, correspondentes aos desenhos de KO CRISPR/Cas9. A disponibilidade do doador HDR pode variar. Consulte Produtos Relacionados para verificar a disponibilidade.
Apenas para uso em investigação. Não se destina a uso diagnóstico ou terapêutico.