Plasmide Double Nickase (h) IRGM: sc-407889-NIC
- Espèces cibles: human
- 20 µg d'ADN plasmidique purifié et prêt à transfecter; Jusqu'à 20 transfections
- Le Plasmide Double Nickase (h) IRGM correspond à une paire de plasmides chacun codant la nucléase Cas9 mutante D10A et un ARN guide (gARN) cible de 20 nt specifique, élaboré pour le knockout optimal de l'expression d'un gène avec une plus grande spécificité que le plasmide KO CRISPR/Cas9 correspondant.
- Les séquences des paires d'ARNg sont décalées de 20 pb environ pour induire avec la Cas9 une double entaille spécifique de l'ADN génomique, qui imite un DSB
- L'un des plasmides de la paire contient un gène de résistance à la puromycine; l'autre plasmide de la paire contient un marqueur GFP pour confirmer visuellement la transfection
- Le plasmide IRGM Double Nickase (h) et le plasmide IRGM Double Nickase (h2) codent pour des paires distinctes de gRNA ciblant IRGM. Un ou les deux modèles peuvent être disponibles
Informations pour la commande
| Nom du produit | Ref. Catalogue | COND. | Prix HT | QTÉ | Favoris | |
Plasmide Double Nickase (h) IRGM | sc-407889-NIC | 20 µg | $410.00 | |||
Plasmide Double Nickase (h2) IRGM | sc-407889-NIC-2 | 20 µg | $410.00 |
IRGM (GTPase M liée à l’immunité) est une GTPase humaine induite par les interférons qui coordonne l’autophagie sélective et la défense immunitaire innée, jouant un rôle majeur dans la xénophagie des pathogènes intracellulaires ainsi que dans la régulation de la formation et de la maturation des autophagosomes. Elle interagit avec la machinerie de l’autophagie et les voies de trafic membranaire, influençant l’élimination des bactéries et la modulation des signaux inflammatoires. Des études génétiques et fonctionnelles ont associé une dérégulation de l’autophagie liée à IRGM à des interactions hôte–microbiote altérées et à des phénotypes inflammatoires chroniques, notamment des signaux de susceptibilité rapportés dans les maladies inflammatoires de l’intestin et d’autres troubles apparentés de l’immunité muqueuse. En tant que nœud reliant autophagie, détection des pathogènes et réponses cytokiniques, IRGM est fréquemment étudiée dans les travaux sur l’adaptation au stress cellulaire, la restriction antimicrobienne et l’homéostasie inflammatoire.
IRGM Le plasmide double nickase (h) se compose d'une paire de plasmides appariés, conçus pour une édition hautement spécifique du locus IRGM dans les lignées cellulaires human. Chaque plasmide exprime une nickase Cas9 D10A et un sgRNA distinct ciblant des brins d'ADN opposés au sein de IRGM. Lorsqu'elles sont dirigées vers des sites adjacents sur des brins d'ADN opposés, les deux nickases génèrent des cassures simple brin décalées qui, ensemble, produisent une cassure double brin décalée, nécessitant une activité coordonnée sur la cible de la part des deux guides. La cassure d'ADN qui en résulte est résolue par les voies de réparation cellulaires endogènes, le plus souvent par jonction non homologue (NHEJ), ce qui conduit à des insertions ou des délétions qui perturbent la fonction de IRGM. En nécessitant l'engagement de deux ARNsg au locus cible, l'approche par double nick améliore la spécificité de l'édition et offre une stratégie CRISPR complémentaire pour les applications où un contrôle supplémentaire de la précision du ciblage est souhaité.
Afin de faciliter l'identification efficace des cellules éditées, un plasmide code pour la GFP permettant la visualisation par fluorescence des populations transfectées, tandis que le plasmide compagnon porte un gène de résistance à la puromycine pour la sélection antibiotique. Ensemble, ces caractéristiques favorisent l'enrichissement efficace des populations co-transfectées et simplifient la validation des clones présentant une perturbation de IRGM.
Réservé à la recherche. N'est pas destiné à un usage diagnostique ou thérapeutique.