Não são dados CRISPR: a imagem ilustra a qualidade do anticorpo para visualizar os resultados da experiência CRISPR.
Não são dados CRISPR: a imagem ilustra a qualidade do anticorpo para visualizar os resultados da experiência CRISPR.
IP3R-III Plasmídeo duplo de Nickase (h): sc-402138-NIC
- alvos específicos: human
- 20 µg de plasmídeo de DNA pronto para transfecção; Suficiente para até 20 transfecções
- IP3R-IIIO plasmídeo de dupla Nickase (h) consiste num par de plasmídeos cada um contem D10A com mutação na nuclease Cas9 nuclease e um alvo especifico de RNA guia com 20 na (gRNA), criado para nocautear a expressão genética com maior especificidade do que o seu correspondente CRISPR/Cas9 KO
- Sequencias pareadas de gRNA são de aproximadamente 20 bp para permitir que os cortes duplos no DNA genômico mediados pela Casp ocorram com especificidade , o que se assemelha ao corte pela DSB
- Cada plasmídeo pertencente ao par de plasmídeos contem um gene de resistência a puromicina para seleção; o outro plasmídeo do par contem um marcador de GFP para a visualização e confirmação da transfecção
- O Plasmídeo Double Nickase IP3R-III (h) e o Plasmídeo Double Nickase IP3R-III (h2) codificam designs distintos de pares de gRNA direcionados para ITPR3. Um ou ambos os desenhos podem estar disponíveis
Informacoes sobre ordens
| Nome do Produto | Numero de Catalogo | UNID | Preco | Qde | FAVORITOS | |
IP3R-III Plasmídeo duplo de Nickase (h) | sc-402138-NIC | 20 µg | $410.00 | |||
IP3R-III Plasmídeo duplo de Nickase (h2) | sc-402138-NIC-2 | 20 µg | $410.00 |
O ITPR3 humano codifica o IP3R-III, um canal de libertação de Ca²⁺ na membrana do retículo endoplasmático, ativado por inositol 1,4,5-trifosfato (IP3) gerado a jusante da sinalização da fosfolipase C. Ao modular a dinâmica de Ca²⁺ no citosol e nos organelos, o IP3R-III regula o acoplamento excitação–secreção, a bioenergética mitocondrial, as respostas ao stress do RE e a apoptose, através da transferência de Ca²⁺ em locais de contacto RE–mitocôndria. O fluxo de cálcio dependente de ITPR3 integra entradas de GPCRs e de recetores tirosina-quinase com programas transcricionais e adaptação metabólica, influenciando decisões de destino celular. A expressão ou sinalização desregulada do IP3R-III tem sido associada a alterações da homeostase do cálcio em contextos de biologia do cancro, fisiologia epitelial e sinalização inflamatória, sustentando a sua utilização como nó mecanístico em estudos de vias de sinalização.
IP3R-III O Plasmídeo de Nickase Dupla (h) consiste num par de plasmídeos combinados, concebidos para a edição de alta especificidade do locus ITPR3 em linhas celulares human. Cada plasmídeo expressa uma nickase Cas9 D10A e um sgRNA distinto que tem como alvo cadeias de ADN opostas dentro de ITPR3. Quando direcionadas para locais adjacentes em cadeias de ADN opostas, as duas nickases geram cortes deslocados numa única cadeia que, em conjunto, produzem uma quebra escalonada de cadeia dupla, exigindo uma atividade coordenada no alvo por parte de ambas as guias. A quebra de ADN resultante é resolvida por vias de reparação celular endógenas, mais frequentemente através da junção de extremidades não homólogas (NHEJ), levando a inserções ou deleções que perturbam a função ITPR3. Ao exigir o envolvimento de dois sgRNA no locus alvo, a abordagem de dupla nickase aumenta a especificidade da edição e fornece uma estratégia CRISPR complementar para aplicações em que se deseja um controlo adicional sobre a precisão do direcionamento.
Para apoiar a identificação eficiente das células editadas, um plasmídeo codifica GFP para visualização fluorescente das populações transfectadas, enquanto o plasmídeo complementar transporta um gene de resistência à puromicina para seleção antibiótica. Em conjunto, estas características apoiam o enriquecimento eficiente das populações co-transfectadas e simplificam a validação dos clones com ITPR3 interrompido.
Apenas para uso em investigação. Não se destina a uso diagnóstico ou terapêutico.