Partículas Lentivirales de Activación (m) Integrin β4/ITGB4/CD104: sc-431434-LAC

Itgb4 codifica la integrina β4 (ITGB4/CD104), un receptor de adhesión que se une a laminina y que se asocia con la integrina α6 para formar α6β4, un componente estructural clave de los hemidesmosomas en los tejidos epiteliales. Mediante su enlace con adaptadores del citoesqueleto y de señalización, α6β4 favorece la adhesión a la membrana basal y regula procesos como la polaridad celular, la migración y la supervivencia, con conexiones funcionales con la dinámica de las adhesiones focales y con programas de señalización asociados a PI3K/AKT y MAPK. La expresión o localización desregulada de ITGB4 se ha asociado con una integridad epitelial alterada y un comportamiento invasivo en modelos de cáncer, y se estudia ampliamente en contextos de biología de la barrera cutánea y de las vías respiratorias, reparación de heridas e interacciones epitelio–estroma.

Las partículas de activación lentiviral Integrin β4/ITGB4/CD104 (m) responden a esta necesidad al empaquetar el sistema completo de activación transcripcional del mediador de activación sinérgica (SAM) en partículas lentivirales de alto título listas para la transducción, lo que permite una regulación al alza eficiente de Itgb4 en una gama más amplia de tipos de células humanas.

Las partículas de activación lentiviral Integrin β4/ITGB4/CD104 (m) suministran todos los componentes funcionales del sistema mediador de activación sinérgica (SAM) a través de la transducción lentiviral. El sistema comprende tres preparaciones de partículas cotransducidas en las células diana: una que codifica dCas9 catalíticamente inactivo (mutaciones D10A y N863A) fusionado al dominio de transactivación VP64 con un gen de resistencia a la blasticidina; otra que codifica la proteína de fusión MS2-p65-HSF1 con un gen de resistencia a la higromicina; y otra que codifica un ARN guía (sgRNA) específico del objetivo de 20 nt fusionado a dos aptámeros de ARN MS2 con un gen de resistencia a la puromicina. Tras la transducción lentiviral y la integración genómica de los casetes de expresión, los componentes del SAM se expresan de forma estable y se ensamblan en el locus diana dentro de la región promotora proximal, aguas arriba del sitio de inicio de la transcripción Itgb4, donde VP64, p65 y HSF1 actúan de forma cooperativa para reclutar la maquinaria transcripcional endógena e impulsar la regulación al alza sostenida de la expresión endógena de Integrin β4/ITGB4/CD104. El uso de dCas9 inactivo frente a nucleasas evita la introducción de roturas de ADN de doble cadena y preserva el locus genómico nativo Itgb4 y la arquitectura reguladora.

El formato lentiviral ofrece varias ventajas prácticas: la integración genómica estable permite la activación hereditaria a lo largo de las divisiones celulares; las preparaciones de partículas de alto título eliminan la necesidad de producir el virus internamente; y la compatibilidad con tipos de células primarias, no divisibles y resistentes a la transfección amplía la accesibilidad experimental. La transducción exitosa puede confirmarse y enriquecerse mediante selección con triple antibiótico utilizando puromicina, higromicina y blasticidina.

Sólo para uso en investigación. No destinado a uso diagnóstico o terapéutico.