INSR/Insulin Receptor Plasmídeo duplo de Nickase (m): sc-421142-NIC
- alvos específicos: mouse
- 20 µg de plasmídeo de DNA pronto para transfecção; Suficiente para até 20 transfecções
- INSR/Insulin ReceptorO plasmídeo de dupla Nickase (m) consiste num par de plasmídeos cada um contem D10A com mutação na nuclease Cas9 nuclease e um alvo especifico de RNA guia com 20 na (gRNA), criado para nocautear a expressão genética com maior especificidade do que o seu correspondente CRISPR/Cas9 KO
- Sequencias pareadas de gRNA são de aproximadamente 20 bp para permitir que os cortes duplos no DNA genômico mediados pela Casp ocorram com especificidade , o que se assemelha ao corte pela DSB
- Cada plasmídeo pertencente ao par de plasmídeos contem um gene de resistência a puromicina para seleção; o outro plasmídeo do par contem um marcador de GFP para a visualização e confirmação da transfecção
- O Plasmídeo Double Nickase INSR/Insulin Receptor (m) e o Plasmídeo Double Nickase INSR/Insulin Receptor (m2) codificam designs distintos de pares de gRNA direcionados para Insr. Um ou ambos os desenhos podem estar disponíveis
- Após a transfecção, a eficácia do processo de nocaute genético por ser testada WB, IF ou IHC usando o anticorpo:INSR/Insulin Receptor β Anticorpo (CT-3): sc-57342
Informacoes sobre ordens
| Nome do Produto | Numero de Catalogo | UNID | Preco | Qde | FAVORITOS | |
INSR/Insulin Receptor Plasmídeo duplo de Nickase (m) | sc-421142-NIC | 20 µg | $410.00 | |||
INSR/Insulin Receptor Plasmídeo duplo de Nickase (m2) | sc-421142-NIC-2 | 20 µg | $410.00 |
Insr codifica o receptor de insulina do camundongo (INSR), uma tirosina quinase de receptor que se liga à insulina para iniciar a sinalização por meio das proteínas adaptadoras IRS e das cascatas downstream PI3K–AKT e RAS–MAPK. Essas vias coordenam a captação de glicose, o metabolismo de glicogênio e lipídios, a síntese proteica e a sobrevivência celular, além de se interconectarem com redes de detecção de nutrientes, como a mTOR. A atividade do INSR influencia a sensibilidade à insulina em tecidos metabólicos, incluindo fígado, músculo e tecido adiposo, e molda as respostas celulares a sinais hormonais e nutricionais. A desregulação da sinalização de Insr é amplamente utilizada como um ponto de partida mecanístico para estudar resistência à insulina, homeostase metabólica e fenótipos endócrino-metabólicos em modelos murinos e sistemas celulares.
INSR/Insulin Receptor O Plasmídeo de Nickase Dupla (m) consiste num par de plasmídeos combinados, concebidos para a edição de alta especificidade do locus Insr em linhas celulares mouse. Cada plasmídeo expressa uma nickase Cas9 D10A e um sgRNA distinto que tem como alvo cadeias de ADN opostas dentro de Insr. Quando direcionadas para locais adjacentes em cadeias de ADN opostas, as duas nickases geram cortes deslocados numa única cadeia que, em conjunto, produzem uma quebra escalonada de cadeia dupla, exigindo uma atividade coordenada no alvo por parte de ambas as guias. A quebra de ADN resultante é resolvida por vias de reparação celular endógenas, mais frequentemente através da junção de extremidades não homólogas (NHEJ), levando a inserções ou deleções que perturbam a função Insr. Ao exigir o envolvimento de dois sgRNA no locus alvo, a abordagem de dupla nickase aumenta a especificidade da edição e fornece uma estratégia CRISPR complementar para aplicações em que se deseja um controlo adicional sobre a precisão do direcionamento.
Para apoiar a identificação eficiente das células editadas, um plasmídeo codifica GFP para visualização fluorescente das populações transfectadas, enquanto o plasmídeo complementar transporta um gene de resistência à puromicina para seleção antibiótica. Em conjunto, estas características apoiam o enriquecimento eficiente das populações co-transfectadas e simplificam a validação dos clones com Insr interrompido.
Apenas para uso em investigação. Não se destina a uso diagnóstico ou terapêutico.