ING2 CRISPR/Cas9 KO Plasmid (h): sc-404193

Übersicht

ING2 (Inhibitor of Growth Family Member 2) ist ein nukleäres, mit Tumorsuppressorfunktionen assoziiertes Protein, das als Chromatin-Reader über seinen C‑terminalen PHD-Finger wirkt, H3K4me3 erkennt und Transkriptionsprogramme koordiniert, die mit der DNA-Schadenssignalgebung und der Kontrolle des Zellzyklus verknüpft sind. Es beteiligt sich an der epigenetischen Regulation, indem es Histon-Acetyltransferase-/Deacetylase-Komplexe einbindet und p53-abhängige Stressantworten moduliert, wodurch es Apoptose, Seneszenz und Genomstabilität beeinflusst. ING2 wurde mit Signalwegen in Verbindung gebracht, die nach genotoxischem Stress die Chromatinzugänglichkeit und die Rekrutierung von Reparaturfaktoren steuern. Eine veränderte ING2-Expression oder -Funktion wurde in mehreren Krebs-Kontexten beschrieben und wird hinsichtlich ihres Beitrags zur onkogenen Transformation, zum metastatischen Potenzial und zu Mechanismen der Therapieresistenz auf molekularer Ebene untersucht.

Das ING2 CRISPR/Cas9-KO-Plasmid (h) ist ein Pool von Plasmiden, die für die gezielte Disruption des ING2-Gens in human-Zelllinien entwickelt wurden. Jedes Plasmid koexprimiert eine einzigartige Single-Guide-RNA (sgRNA), die auf eine bestimmte Stelle innerhalb des ING2-Gens abzielt, zusammen mit der Streptococcus pyogenes Cas9-Nuklease. Die Plasmide kodieren zudem für GFP, was die fluoreszente Identifizierung und Anreicherung erfolgreich transfizierter Zellen mittels Fluoreszenzmikroskopie oder Durchflusszytometrie ermöglicht.

Das Multi-Guide-Design erhöht die Wahrscheinlichkeit, dass Insertionen oder Deletionen (Indels) entstehen, die den offenen Leserahmen von ING2 nach der Cas9-vermittelten Bildung von Doppelstrangbrüchen unterbrechen. Durch das CRISPR/Cas9-System verursachte DNA-Brüche werden über endogene NHEJ-Wege (Non-Homologous End Joining) repariert, was häufig zu Frameshift-Mutationen führt, die die ING2-Proteinexpression aufheben.

Dieses CRISPR-Knockout-System ermöglicht die effiziente Erzeugung von ING2-defizienten Zellmodellen zur Untersuchung der ING2-Signalübertragung, für funktionelle Genomstudien, in der Krebsbiologieforschung sowie zur Bewertung therapeutischer Reaktionen in menschlichen Zelllinien.

Hauptmerkmale

• sgRNAs, die auf ING2-Exone abzielen, die für die ING2-Funktion entscheidend sind
  Ko-Expression von SpCas9 und sgRNA aus einem einzigen Plasmid zur vereinfachten Verabreichung
  GFP-Reporter zur Identifizierung transfizierter Zellen
  Pool von Plasmiden, die auf mehrere ING2-Genomstellen abzielen, um die Knockout-Effizienz zu verbessern
  Kompatibel mit der Verabreichung durch Transfektion

Designvarianten

CRISPRs +/- HDRs

• gRNAs, die vom ING2 CRISPR/Cas9-KO-Plasmid (h) und vom ING2 CRISPR/Cas9-KO-Plasmid (h2) kodiert werden, zielen auf unterschiedliche Stellen innerhalb des ING2-Lokus ab. Es kann ein oder beide Targeting-Designs verfügbar sein. Siehe „Verwandte Produkte“ für Verfügbarkeit.
  HDR-Donorkonstrukte, kodiert durch das ING2 HDR-Plasmid (h) und ING2 HDR-Plasmid (h2) kodiert, enthalten eine Puromycin-Resistenzkassette und einen RFP-Reporter, flankiert von ING2-Homologiearmen, um die homologe Reparatur an definierten ING2-Zielstellen entsprechend den CRISPR/Cas9-KO-Designs zu unterstützen. Die Verfügbarkeit von HDR-Donoren kann variieren. Siehe „Verwandte Produkte“ für Verfügbarkeit.

Nur für Forschungszwecke. Nicht für diagnostische oder therapeutische Zwecke bestimmt.