Plásmido Doble Nickase (h) IMMP1L: sc-414955-NIC
- Especies Diana: human
- 20 µg de plásmido de ADN purificado listo para la trasfección; suficiente para 20 transfecciones máximo
- El Plásmido Double Nickase (h)IMMP1L consisten en un par de plásmidos cada uno codificando una nucleasa Cas9 mutada D10A y una guia de ARN de 20 nucleótidos (gRNA) diseñados para una mayor especificidad que el homologo CRISPR/Cas9 KO
- Las secuencias de gRNA tienen una diferencia de unas 20 pb para permitir un corte doble mediado por Cas9 en el ADN que imita el doble corte
- Uno de los plásmidos contiene el gen de resistencia a puromicina para la selección y el otro el marcado GFP para confirmar visualmente la transfección
- El plásmido de doble nickasa IMMP1L (h) y el plásmido de doble nickasa IMMP1L (h2) codifican diseños distintos de pares de gRNA dirigidos a IMMP1L. Puede que esté disponible uno o ambos diseños
Información sobre pedidos
| Nombre del producto | Número de catálogo | UNIDAD | Precio | CANTIDAD | Favoritos | |
Plásmido Doble Nickase (h) IMMP1L | sc-414955-NIC | 20 µg | $410.00 |
IMMP1L codifica una subunidad de una peptidasa de la membrana interna mitocondrial que participa en la maduración de proteínas mitocondriales importadas mediante el procesamiento de péptidos señal tras su translocación a la membrana interna. Al respaldar el control de calidad de las proteínas mitocondriales y la competencia de la fosforilación oxidativa, IMMP1L ayuda a mantener la homeostasis bioenergética y limita respuestas de estrés secundarias asociadas a la disfunción mitocondrial, incluidos cambios en el manejo de las especies reactivas de oxígeno y en la dinámica de la mitofagia. Estudios genéticos y funcionales han asociado variaciones en IMMP1L con fenotipos del neurodesarrollo y neuropsiquiátricos, en consonancia con la alta sensibilidad de las neuronas a perturbaciones en la proteostasis mitocondrial. Por lo tanto, IMMP1L es relevante para la investigación mecanística de las vías de procesamiento mitocondrial y de cómo la actividad de proteasas de la membrana interna moldea el metabolismo celular y la adaptación al estrés.
IMMP1L El plásmido de doble nicasa (h) consiste en un par de plásmidos emparejados diseñados para la edición de alta especificidad del locus IMMP1L en líneas celulares human. Cada plásmido expresa una nicasa Cas9 D10A y un ARN guía específico (sgRNA) dirigido a cadenas de ADN opuestas dentro de IMMP1L. Cuando se dirigen a sitios adyacentes en cadenas de ADN opuestas, las dos nicasas generan cortes en cadena simple desplazados que, juntos, producen una rotura de doble cadena escalonada, lo que requiere una actividad coordinada sobre el objetivo por parte de ambas guías. La rotura de ADN resultante se resuelve mediante vías de reparación celular endógenas, más comúnmente a través de la unión de extremos no homólogos (NHEJ), lo que da lugar a inserciones o deleciones que alteran la función de IMMP1L. Al requerir la participación de dos ARN guía en el locus diana, el enfoque de doble corte mejora la especificidad de la edición y proporciona una estrategia CRISPR complementaria para aplicaciones en las que se desea un control adicional sobre la precisión de la orientación.
Para facilitar la identificación eficiente de las células editadas, un plásmido codifica GFP para la visualización fluorescente de las poblaciones transfectadas, mientras que el plásmido complementario lleva un gen de resistencia a la puromicina para la selección con antibióticos. En conjunto, estas características facilitan el enriquecimiento eficiente de las poblaciones cotransfectadas y simplifican la validación de los clones con IMMP1L alterado.
Sólo para uso en investigación. No destinado a uso diagnóstico o terapéutico.