IL-7R Double Nickase Plasmid (h): sc-401536-NIC
- Zielspezies: human
- 20 µg transfektionsfertige, aufgereinigte Plasmid DNA; geeignet für 20 Transfektionen
- Das IL-7R Double Nickase Plasmid (h) wird als Plasmid-Paar geliefert. Die einzelnen Plasmide kodieren für eine D10A mutierte Cas9 Nuklease sowie für je eine unterschiedliche, zielspezifische 20nt guide RNA (gRNA) Sequenz. Dies erlaubt eine hohe Knockout-Effizienz bei gleichzeitig größerer Spezifität als das entsprechende CRISPR/Cas9 KO Plasmid
- gRNA Sequenzpaare liegen ca. 20 bp auseinander um ein spezifisches Cas9-vermitteltes "Double Nicking" der genomischen DNA zu erlauben und so im Resultat den Effekt eines Doppelstrangbruchs nachzuahmen.
- Ein Plasmid kodiert für ein Puromycin-Resistenzgen zur Selektion von stabilen Knockout-Zellen. Das andere Plasmid kodiert für ein GFP-Gen für den visuellen Nachweis der Transfektion
- IL-7R Double-Nickase-Plasmid (h) und IL-7R Double-Nickase-Plasmid (h2) kodieren unterschiedliche gepaarte gRNA-Designs, die auf IL7R abzielen. Möglicherweise ist eines oder sind beide Designs verfügbar
- Nach der Transfektion kann die Effizienz des Gen-Knockouts per Western Blot oder histologisch mit folgendem Antikörper überprüft werden: IL-7R: sc-514445
Bestellinformation
| Produkt | Katalog # | EINHEIT | Preis | ANZAHL | Favoriten | |
IL-7R Double Nickase Plasmid (h) | sc-401536-NIC | 20 µg | $410.00 | |||
IL-7R Double Nickase Plasmid (h2) | sc-401536-NIC-2 | 20 µg | $410.00 |
Das humane **IL7R**-Gen kodiert die Interleukin‑7‑Rezeptor‑α‑Kette (IL‑7R/CD127), eine zentrale Untereinheit eines Zytokinrezeptors, die mit der gemeinsamen Gamma‑Kette dimerisiert und so einen funktionsfähigen IL‑7‑Rezeptorkomplex bildet, der für die T‑Zellentwicklung, die thymische Output‑Leistung und die Homöostase peripherer Lymphozyten essenziell ist. Die Bindung von IL‑7R aktiviert eine JAK1/JAK3‑abhängige Signalübertragung mit nachgeschalteter STAT5‑Phosphorylierung sowie Crosstalk zu den PI3K‑AKT‑ und MAPK‑Signalwegen und integriert damit Überlebens‑, Proliferations‑ und Differenzierungssignale in Immunzellen. Veränderte IL7R‑Expression oder ‑Signalgebung wurde mit Immunfehlregulation in Verbindung gebracht, darunter eine erhöhte Anfälligkeit für Autoimmunität und Signalwege, die mit lymphoiden Malignomen assoziiert sind, wodurch IL7R ein breit untersuchter Knotenpunkt in der Immunologie‑ und Hämatopoese‑Forschung ist.
IL-7R Das Double-Nickase-Plasmid (h) besteht aus einem aufeinander abgestimmten Plasmidpaar, das für die hochspezifische Bearbeitung des IL7R-Lokus in human-Zelllinien entwickelt wurde. Jedes Plasmid exprimiert eine Cas9-D10A-Nickase und eine spezifische sgRNA, die auf entgegengesetzte DNA-Stränge innerhalb von IL7R abzielt. Wenn sie auf benachbarte Stellen auf entgegengesetzten DNA-Strängen gerichtet sind, erzeugen die beiden Nickasen versetzte Einzelstrang-Schnitte, die zusammen einen versetzten Doppelstrangbruch erzeugen, was eine koordinierte On-Target-Aktivität beider Guides erfordert. Der resultierende DNA-Bruch wird durch endogene zelluläre Reparaturwege behoben, meist durch nicht-homologe Endverknüpfung (NHEJ), was zu Insertionen oder Deletionen führt, die die IL7R-Funktion stören. Durch die Notwendigkeit einer doppelten sgRNA-Bindung am Zielort erhöht der Doppel-Nick-Ansatz die Spezifität der Bearbeitung und bietet eine komplementäre CRISPR-Strategie für Anwendungen, bei denen eine zusätzliche Kontrolle über die Zielgenauigkeit gewünscht ist.
Um eine effiziente Identifizierung editierter Zellen zu unterstützen, kodiert ein Plasmid GFP zur fluoreszierenden Visualisierung transfizierter Populationen, während das Begleitplasmid ein Puromycin-Resistenzgen für die Antibiotika-Selektion trägt. Zusammen unterstützen diese Merkmale eine effiziente Anreicherung co-transfizierter Populationen und vereinfachen die Validierung von Klonen mit IL7R-Störung.
Nur für Forschungszwecke. Nicht für diagnostische oder therapeutische Zwecke bestimmt.