Not CRISPR data: the image illustrates antibody quality for visualizing CRISPR experiment results.
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IL-6Rα Double Nickase Plasmid (h): sc-400582-NIC
- Zielspezies: human
- 20 µg transfektionsfertige, aufgereinigte Plasmid DNA; geeignet für 20 Transfektionen
- Das IL-6Rα Double Nickase Plasmid (h) wird als Plasmid-Paar geliefert. Die einzelnen Plasmide kodieren für eine D10A mutierte Cas9 Nuklease sowie für je eine unterschiedliche, zielspezifische 20nt guide RNA (gRNA) Sequenz. Dies erlaubt eine hohe Knockout-Effizienz bei gleichzeitig größerer Spezifität als das entsprechende CRISPR/Cas9 KO Plasmid
- gRNA Sequenzpaare liegen ca. 20 bp auseinander um ein spezifisches Cas9-vermitteltes "Double Nicking" der genomischen DNA zu erlauben und so im Resultat den Effekt eines Doppelstrangbruchs nachzuahmen.
- Ein Plasmid kodiert für ein Puromycin-Resistenzgen zur Selektion von stabilen Knockout-Zellen. Das andere Plasmid kodiert für ein GFP-Gen für den visuellen Nachweis der Transfektion
- IL-6Rα Double-Nickase-Plasmid (h) und IL-6Rα Double-Nickase-Plasmid (h2) kodieren unterschiedliche gepaarte gRNA-Designs, die auf IL6R abzielen. Möglicherweise ist eines oder sind beide Designs verfügbar
- Nach der Transfektion kann die Effizienz des Gen-Knockouts per Western Blot oder histologisch mit folgendem Antikörper überprüft werden: IL-6Rα: sc-373708
Bestellinformation
| Produkt | Katalog # | EINHEIT | Preis | ANZAHL | Favoriten | |
IL-6Rα Double Nickase Plasmid (h) | sc-400582-NIC | 20 µg | $410.00 | |||
IL-6Rα Double Nickase Plasmid (h2) | sc-400582-NIC-2 | 20 µg | $410.00 |
Interleukin-6-Rezeptor alpha (IL-6Rα), kodiert durch IL6R, ist die ligandenbindende Untereinheit des IL-6-Rezeptorkomplexes, der nach Bindung von IL-6 und Assoziation mit dem Korezeptor GP130 die Signalübertragung initiiert. Diese Rezeptorachse aktiviert JAK/STAT3 sowie die MAPK- und PI3K/AKT-Signalwege und koordiniert Akutphasenreaktionen, die Differenzierung von Leukozyten und umfassendere inflammatorische Genprogramme. IL6R trägt zudem über löslichen IL-6R zur IL-6-Trans-Signalübertragung bei und erweitert damit die Responsivität auf Zellen, die überwiegend GP130 exprimieren. Eine fehlregulierte IL6R-Signalgebung wurde mit chronischer Entzündung und immunvermittelten Pathologien in Verbindung gebracht und wird häufig in Kontexten wie der Biologie autoimmuner Erkrankungen, krebsassoziierter Inflammation und kardiovaskulärer Entzündungsprozesse untersucht.
IL-6Rα Das Double-Nickase-Plasmid (h) besteht aus einem aufeinander abgestimmten Plasmidpaar, das für die hochspezifische Bearbeitung des IL6R-Lokus in human-Zelllinien entwickelt wurde. Jedes Plasmid exprimiert eine Cas9-D10A-Nickase und eine spezifische sgRNA, die auf entgegengesetzte DNA-Stränge innerhalb von IL6R abzielt. Wenn sie auf benachbarte Stellen auf entgegengesetzten DNA-Strängen gerichtet sind, erzeugen die beiden Nickasen versetzte Einzelstrang-Schnitte, die zusammen einen versetzten Doppelstrangbruch erzeugen, was eine koordinierte On-Target-Aktivität beider Guides erfordert. Der resultierende DNA-Bruch wird durch endogene zelluläre Reparaturwege behoben, meist durch nicht-homologe Endverknüpfung (NHEJ), was zu Insertionen oder Deletionen führt, die die IL6R-Funktion stören. Durch die Notwendigkeit einer doppelten sgRNA-Bindung am Zielort erhöht der Doppel-Nick-Ansatz die Spezifität der Bearbeitung und bietet eine komplementäre CRISPR-Strategie für Anwendungen, bei denen eine zusätzliche Kontrolle über die Zielgenauigkeit gewünscht ist.
Um eine effiziente Identifizierung editierter Zellen zu unterstützen, kodiert ein Plasmid GFP zur fluoreszierenden Visualisierung transfizierter Populationen, während das Begleitplasmid ein Puromycin-Resistenzgen für die Antibiotika-Selektion trägt. Zusammen unterstützen diese Merkmale eine effiziente Anreicherung co-transfizierter Populationen und vereinfachen die Validierung von Klonen mit IL6R-Störung.
Nur für Forschungszwecke. Nicht für diagnostische oder therapeutische Zwecke bestimmt.