IK1 Lentiviral Activation Particles (h): sc-402139-LAC

KCNN4 kodiert den mittelkonduktanten, Ca2+-aktivierten K+-Kanal IK1 (KCa3.1), ein Membranprotein, das intrazelluläre Calciumsignale mit Kaliumausstrom und Membranhyperpolarisation koppelt. Durch die Formung des Membranpotentials und des Calciumeinstroms beeinflusst IK1 Prozesse wie die Regulation des Zellvolumens, den epithelialen Elektrolyttransport und aktivierungsabhängige Signalwege in Immunzellen. Die Aktivität von KCNN4/IK1 greift in Ca2+-abhängige Signalwege ein, die Proliferation, Migration und Zytokinantworten modulieren, wodurch sie für Studien zu Entzündung und Gewebeumbau relevant ist. Eine veränderte IK1-Funktion wurde mit pathologischen Veränderungen in der Gefäß-, Atemwegs- und Immunbiologie in Verbindung gebracht, was seine Nutzung als mechanistisches Ziel in der Krankheitsmodellierung stützt.

IK1 Lentivirale Aktivierungspartikel (h) erfüllen diesen Bedarf, indem sie das vollständige Transkriptionsaktivierungssystem des Synergistic Activation Mediator (SAM) in transduktionsbereite, hoch-titrige lentivirale Partikel verpacken und so eine effiziente KCNN4-Hochregulation über ein breiteres Spektrum menschlicher Zelltypen ermöglichen.

IK1 Lentivirale Aktivierungspartikel (h) liefern alle funktionellen Komponenten des Synergistic Activation Mediator (SAM)-Systems über lentivirale Transduktion. Das System umfasst drei Partikelpräparate, die gemeinsam in Zielzellen transduziert werden: eines, das für katalytisch inaktives dCas9 (Mutationen D10A und N863A) kodiert, das mit der VP64-Transaktivierungsdomäne und einem Blasticidin-Resistenzgen fusioniert ist; eines, das für das MS2-p65-HSF1-Fusionsprotein mit einem Hygromycin-Resistenzgen kodiert; und eines, das für eine zielspezifische 20-nt-sgRNA kodiert, die an zwei MS2-RNA-Aptamere mit einem Puromycin-Resistenzgen fusioniert ist. Nach der lentiviralen Transduktion und der genomischen Integration der Expressionskassetten werden die SAM-Komponenten stabil exprimiert und lagern sich am Zielort innerhalb der proximalen Promotorregion stromaufwärts der KCNN4-Transkriptionsstartstelle an, wo VP64, p65 und HSF1 kooperativ wirken, um endogene Transkriptionsmaschinerie zu rekrutieren und eine anhaltende Hochregulation der endogenen IK1-Expression zu bewirken. Die Verwendung von nuklease-inaktivem dCas9 verhindert die Einführung von Doppelstrangbrüchen in der DNA und bewahrt den nativen KCNN4-Genomlokus sowie die regulatorische Architektur.

Das lentivirale Format bietet mehrere praktische Vorteile: Die stabile genomische Integration unterstützt eine vererbbare Aktivierung über Zellteilungen hinweg; Partikelpräparate mit hohem Titer machen eine eigene Virusproduktion überflüssig; und die Kompatibilität mit primären, sich nicht teilenden und transfektionsresistenten Zelltypen erweitert die experimentellen Möglichkeiten. Eine erfolgreiche Transduktion kann durch eine dreifache Antibiotika-Selektion mit Puromycin, Hygromycin und Blasticidin bestätigt und verstärkt werden.

Nur für Forschungszwecke. Nicht für diagnostische oder therapeutische Zwecke bestimmt.