Plásmido Doble Nickase (m) IGFBP4: sc-421065-NIC
- Especies Diana: mouse
- 20 µg de plásmido de ADN purificado listo para la trasfección; suficiente para 20 transfecciones máximo
- El Plásmido Double Nickase (m)IGFBP4 consisten en un par de plásmidos cada uno codificando una nucleasa Cas9 mutada D10A y una guia de ARN de 20 nucleótidos (gRNA) diseñados para una mayor especificidad que el homologo CRISPR/Cas9 KO
- Las secuencias de gRNA tienen una diferencia de unas 20 pb para permitir un corte doble mediado por Cas9 en el ADN que imita el doble corte
- Uno de los plásmidos contiene el gen de resistencia a puromicina para la selección y el otro el marcado GFP para confirmar visualmente la transfección
- El plásmido de doble nickasa IGFBP4 (m) y el plásmido de doble nickasa IGFBP4 (m2) codifican diseños distintos de pares de gRNA dirigidos a Igfbp4. Puede que esté disponible uno o ambos diseños
Información sobre pedidos
| Nombre del producto | Número de catálogo | UNIDAD | Precio | CANTIDAD | Favoritos | |
Plásmido Doble Nickase (m) IGFBP4 | sc-421065-NIC | 20 µg | $410.00 |
Igfbp4 codifica la proteína 4 de unión a los factores de crecimiento similares a la insulina (IGFBP4), un regulador secretado de la biodisponibilidad de los IGF que modula las interacciones de IGF1/IGF2 con los receptores de IGF e influye en la señalización aguas abajo de PI3K–AKT y MAPK. Al secuestrar IGF y moldear gradientes locales de factores de crecimiento, IGFBP4 contribuye al control de la proliferación, diferenciación y supervivencia celular, así como de la remodelación tisular. En biología del ratón, Igfbp4 se estudia en contextos como la homeostasis vascular y cardíaca, el desarrollo esquelético y la regulación reproductiva y metabólica, donde la señalización de IGF es un impulsor clave de los resultados fenotípicos. La actividad desregulada del eje IGFBP4/IGF se ha asociado con procesos relevantes para enfermedad, como fibrosis, angiogénesis y control anómalo del crecimiento, lo que convierte a Igfbp4 en un locus útil para estudios mecanísticos de vías.
IGFBP4 El plásmido de doble nicasa (m) consiste en un par de plásmidos emparejados diseñados para la edición de alta especificidad del locus Igfbp4 en líneas celulares mouse. Cada plásmido expresa una nicasa Cas9 D10A y un ARN guía específico (sgRNA) dirigido a cadenas de ADN opuestas dentro de Igfbp4. Cuando se dirigen a sitios adyacentes en cadenas de ADN opuestas, las dos nicasas generan cortes en cadena simple desplazados que, juntos, producen una rotura de doble cadena escalonada, lo que requiere una actividad coordinada sobre el objetivo por parte de ambas guías. La rotura de ADN resultante se resuelve mediante vías de reparación celular endógenas, más comúnmente a través de la unión de extremos no homólogos (NHEJ), lo que da lugar a inserciones o deleciones que alteran la función de Igfbp4. Al requerir la participación de dos ARN guía en el locus diana, el enfoque de doble corte mejora la especificidad de la edición y proporciona una estrategia CRISPR complementaria para aplicaciones en las que se desea un control adicional sobre la precisión de la orientación.
Para facilitar la identificación eficiente de las células editadas, un plásmido codifica GFP para la visualización fluorescente de las poblaciones transfectadas, mientras que el plásmido complementario lleva un gen de resistencia a la puromicina para la selección con antibióticos. En conjunto, estas características facilitan el enriquecimiento eficiente de las poblaciones cotransfectadas y simplifican la validación de los clones con Igfbp4 alterado.
Sólo para uso en investigación. No destinado a uso diagnóstico o terapéutico.