Plasmide Double Nickase (h) IGFBP2: sc-401076-NIC

IGFBP2 (protéine de liaison au facteur de croissance de type insuline 2) est un régulateur sécrété de la signalisation IGF qui module la biodisponibilité et l’engagement des récepteurs par l’IGF‑I/IGF‑II, influençant l’activité des voies PI3K–AKT et MAPK. Au-delà de la séquestration des ligands, IGFBP2 peut interagir avec des composants de la matrice extracellulaire et des intégrines afin d’affecter les programmes d’adhérence cellulaire, de migration et de survie. Son expression est fréquemment modifiée dans des contextes impliquant la régulation métabolique, le remodelage tissulaire, l’inflammation et la signalisation oncogénique, ce qui en fait une cible pertinente pour l’étude des phénotypes induits par les facteurs de croissance. L’étude d’IGFBP2 soutient des investigations mécanistiques sur la signalisation proliférative, la motilité cellulaire et les interactions avec le microenvironnement dans divers modèles cellulaires humains.

IGFBP2 Le plasmide double nickase (h) se compose d'une paire de plasmides appariés, conçus pour une édition hautement spécifique du locus IGFBP2 dans les lignées cellulaires human. Chaque plasmide exprime une nickase Cas9 D10A et un sgRNA distinct ciblant des brins d'ADN opposés au sein de IGFBP2. Lorsqu'elles sont dirigées vers des sites adjacents sur des brins d'ADN opposés, les deux nickases génèrent des cassures simple brin décalées qui, ensemble, produisent une cassure double brin décalée, nécessitant une activité coordonnée sur la cible de la part des deux guides. La cassure d'ADN qui en résulte est résolue par les voies de réparation cellulaires endogènes, le plus souvent par jonction non homologue (NHEJ), ce qui conduit à des insertions ou des délétions qui perturbent la fonction de IGFBP2. En nécessitant l'engagement de deux ARNsg au locus cible, l'approche par double nick améliore la spécificité de l'édition et offre une stratégie CRISPR complémentaire pour les applications où un contrôle supplémentaire de la précision du ciblage est souhaité.

Afin de faciliter l'identification efficace des cellules éditées, un plasmide code pour la GFP permettant la visualisation par fluorescence des populations transfectées, tandis que le plasmide compagnon porte un gène de résistance à la puromycine pour la sélection antibiotique. Ensemble, ces caractéristiques favorisent l'enrichissement efficace des populations co-transfectées et simplifient la validation des clones présentant une perturbation de IGFBP2.

Réservé à la recherche. N'est pas destiné à un usage diagnostique ou thérapeutique.