IFN-α4 Plásmido CRISPR/Cas9 KO (m): sc-421041

Descripción general

Ifna4 codifica el interferón-α4 (IFN-α4), un interferón de tipo I producido en respuesta a ácidos nucleicos virales y otros estímulos de la inmunidad innata. El IFN-α4 se une al complejo receptor IFNAR para activar la fosforilación de STAT1/STAT2 dependiente de JAK1/TYK2 y la formación del complejo transcripcional ISGF3, induciendo genes estimulados por interferón que restringen la replicación de patógenos y modulan la presentación de antígenos. Esta señalización configura el diálogo cruzado con las vías de NF-κB e IRF, influyendo en programas génicos inflamatorios, la activación mieloide y el cebado de la inmunidad adaptativa. La actividad desregulada de los interferones de tipo I es relevante para la investigación en inflamación crónica y autoinmunidad, así como para modelos de interacción huésped–patógeno en los que el “tono” de interferón afecta la susceptibilidad a la enfermedad y la patología tisular.

El plásmido CRISPR/Cas9 KO IFN-α4 (m) es un conjunto de plásmidos diseñado para la interrupción dirigida del gen Ifna4 en líneas celulares mouse. Cada plásmido coexpresa un ARN guía único (sgRNA) dirigido a un sitio distinto dentro del Ifna4 junto con la nucleasa Cas9 de Streptococcus pyogenes. Los plásmidos también codifican GFP, lo que permite la identificación fluorescente y el enriquecimiento de las células transfectadas con éxito mediante microscopía de fluorescencia o citometría de flujo.

El diseño multiguía aumenta la probabilidad de generar inserciones o deleciones (indeles) que interrumpan el marco de lectura abierto de Ifna4 tras la formación de roturas de doble cadena mediadas por Cas9. Las roturas de ADN introducidas por el sistema CRISPR/Cas9 se reparan a través de vías endógenas de unión de extremos no homólogos (NHEJ), lo que con frecuencia da lugar a mutaciones de desplazamiento del marco de lectura que anulan la expresión de la proteína IFN-α4.

Este sistema de knockout CRISPR permite la generación eficiente de modelos celulares deficientes en Ifna4 para la investigación de la señalización de IFN-α4, estudios de genómica funcional, investigación en biología del cáncer y evaluación de respuestas terapéuticas en líneas celulares humanas.

Características principales

• sgRNA dirigidos a los exones de Ifna4 críticos para la función de IFN-α4
  Coexpresión de SpCas9 y sgRNA a partir de un único plásmido para simplificar la administración
  Reportero GFP para la identificación de células transfectadas
  Conjunto de plásmidos dirigidos a múltiples sitios genómicos de Ifna4 para mejorar la eficiencia del knockout
  Compatible con la administración mediante transfección

Variantes de diseño

CRISPRs +/- HDRs

• Los gRNA codificados por el plásmido IFN-α4 CRISPR/Cas9 KO (m) y el plásmido IFN-α4 CRISPR/Cas9 KO (m2) se dirigen a sitios distintos dentro del locus Ifna4. Puede estar disponible uno o ambos diseños de orientación. Consulte «Productos relacionados» para conocer la disponibilidad.
  Las construcciones donantes HDR codificadas por el plásmido HDR IFN-α4 (m) y el plásmido HDR IFN-α4 (m2) contienen un casete de resistencia a la puromicina y un reportero RFP flanqueado por brazos de homología Ifna4 para facilitar la reparación dirigida por homología en sitios diana Ifna4 definidos que se corresponden con los diseños de KO de CRISPR/Cas9. La disponibilidad de los donantes HDR puede variar. Consulte «Productos relacionados» para conocer la disponibilidad.

Sólo para uso en investigación. No destinado a uso diagnóstico o terapéutico.