Not CRISPR data: the image illustrates antibody quality for visualizing CRISPR experiment results.
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IFITM2 Double Nickaseプラスミド (h): sc-403889-NIC
- 対象生物種: human
- 20 µg のトランスフェクション準備済み、精製したプラスミドDNA、～20回トランスフェクション
- IFITM2 Double Nickaseプラスミド (h)はペアのプラスミドを含みます。それぞれのプラスミドはD10A変異したCas9 nuclease、及びCRISPR/Cas9 KOの対応よりも高い特異性で遺伝子発現をノックアウトするように設計された標的特異的な20 ntガイドRNA (gRNA)をコードします。
- ペアリングしたガイドRNAは、約20 bpでずらすことにより、ゲノムDNAの特定Cas9媒介のdouble nickingを可能にし、DSBを模造します。
- ペアの1つのプラスミドは選択用のピューロマイシン耐性遺伝子を含みます；ペアのほかの1つのプラスミドは、視覚的にトランスフェクションを確認するGFPマーカーを含みます。
- IFITM2ダブルニカースプラスミド（h）およびIFITM2ダブルニカースプラスミド（h2）は、IFITM2を標的とする異なるペアのgRNA設計をコードしています。いずれか一方、あるいは両方のデザインが利用可能である場合があります
注文情報
| 製品名 | カタログ # | 単位 | 価格 | 数量 | お気に入り | |
IFITM2 Double Nickaseプラスミド (h) | sc-403889-NIC | 20 µg | $410.00 | |||
IFITM2 Double Nickaseプラスミド (h2) | sc-403889-NIC-2 | 20 µg | $410.00 |
IFITM2（interフェロン誘導性膜貫通タンパク質2）は、I型およびII型インターフェロンシグナルによって誘導されるII型膜貫通タンパク質であり、多様なエンベロープウイルスの侵入および複製初期段階を制限する内在性の制限因子として機能します。主にエンドソームおよび細胞膜（形質膜）区画に局在し、膜の性質やトラフィッキングを変化させることでウイルスの膜融合と取り込みを阻害し、自然免疫防御およびインターフェロン刺激遺伝子ネットワークと結び付いています。IFITM2の活性は、エンドサイトーシス、小胞の組織化、炎症性シグナル伝達を制御する経路と交差しており、その発現はインターフェロン経路の活性化の指標としてしばしば用いられます。IFITM2発現の制御異常は、異常な免疫活性化や感染に伴う炎症状態の文脈で研究されており、宿主—病原体相互作用の機序解明研究における重要性を裏付けています。
IFITM2 ダブルニカースプラスミド（h）は、human 細胞株における IFITM2 座の高特異性編集のために設計された、対となる2つのプラスミドから構成される。各プラスミドは、Cas9 D10Aニカースと、IFITM2内の対向するDNA鎖を標的とする異なるsgRNAを発現する。対向するDNA鎖上の隣接する部位に誘導されると、2つのニカースはオフセットした一本鎖切断を生成し、これらが組み合わさってずれた二本鎖切断を生じさせる。これにより、両方のガイドによる協調的なオンターゲット活性が必要となる。生じたDNA切断は、細胞内の内在性修復経路、特に非相同末端結合（NHEJ）によって修復され、その結果、IFITM2の機能を阻害する挿入または欠失が生じる。標的座標における2つのsgRNAの結合を必要とするこの二重ニッキング法は、編集の特異性を高め、標的精度に対するさらなる制御が求められる用途において、CRISPR戦略を補完するものである。
編集された細胞を効率的に同定するために、1つのプラスミドはトランスフェクトされた細胞集団を蛍光可視化するためのGFPをコードし、もう1つのプラスミドは抗生物質選別用のプロマイシン耐性遺伝子を保有しています。これらの機能により、共トランスフェクトされた細胞集団の効率的な濃縮が可能となり、IFITM2が破壊されたクローンの検証が簡素化されます。
研究用のみ。診断用または治療用ではありません。