Plásmido Doble Nickase (h) IFIT3: sc-403557-NIC

La proteína inducida por interferón con repeticiones tetratricopeptídicas 3 (IFIT3) es el producto de un gen estimulado por interferón que participa en la defensa antiviral innata aguas abajo de la señalización por interferones de tipo I/III y de los receptores de reconocimiento de patrones. IFIT3 forma complejos con otros miembros de la familia IFIT y modula la detección de ARN, el control de la traducción y la amplificación de las respuestas de interferón impulsadas por JAK–STAT, influyendo en la expresión de programas efectores antivirales más amplios. A través de estas actividades, IFIT3 contribuye a la restricción celular de la replicación viral y moldea redes de señalización inflamatoria como NF-κB y la transcripción dependiente de IRF. La expresión desregulada de IFIT3 se ha asociado con cambios en la capacidad de respuesta antiviral y con estados inflamatorios, lo que la convierte en un objetivo útil para estudios mecanísticos en biología de la infección, inmunología y señalización de interferón relacionada con el cáncer.

IFIT3 El plásmido de doble nicasa (h) consiste en un par de plásmidos emparejados diseñados para la edición de alta especificidad del locus IFIT3 en líneas celulares human. Cada plásmido expresa una nicasa Cas9 D10A y un ARN guía específico (sgRNA) dirigido a cadenas de ADN opuestas dentro de IFIT3. Cuando se dirigen a sitios adyacentes en cadenas de ADN opuestas, las dos nicasas generan cortes en cadena simple desplazados que, juntos, producen una rotura de doble cadena escalonada, lo que requiere una actividad coordinada sobre el objetivo por parte de ambas guías. La rotura de ADN resultante se resuelve mediante vías de reparación celular endógenas, más comúnmente a través de la unión de extremos no homólogos (NHEJ), lo que da lugar a inserciones o deleciones que alteran la función de IFIT3. Al requerir la participación de dos ARN guía en el locus diana, el enfoque de doble corte mejora la especificidad de la edición y proporciona una estrategia CRISPR complementaria para aplicaciones en las que se desea un control adicional sobre la precisión de la orientación.

Para facilitar la identificación eficiente de las células editadas, un plásmido codifica GFP para la visualización fluorescente de las poblaciones transfectadas, mientras que el plásmido complementario lleva un gen de resistencia a la puromicina para la selección con antibióticos. En conjunto, estas características facilitan el enriquecimiento eficiente de las poblaciones cotransfectadas y simplifican la validación de los clones con IFIT3 alterado.

Sólo para uso en investigación. No destinado a uso diagnóstico o terapéutico.