Not CRISPR data: the image illustrates antibody quality for visualizing CRISPR experiment results.
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Plásmido Doble Nickase (h) IDO: sc-400495-NIC
- Especies Diana: human
- 20 µg de plásmido de ADN purificado listo para la trasfección; suficiente para 20 transfecciones máximo
- El Plásmido Double Nickase (h)IDO consisten en un par de plásmidos cada uno codificando una nucleasa Cas9 mutada D10A y una guia de ARN de 20 nucleótidos (gRNA) diseñados para una mayor especificidad que el homologo CRISPR/Cas9 KO
- Las secuencias de gRNA tienen una diferencia de unas 20 pb para permitir un corte doble mediado por Cas9 en el ADN que imita el doble corte
- Uno de los plásmidos contiene el gen de resistencia a puromicina para la selección y el otro el marcado GFP para confirmar visualmente la transfección
- El plásmido de doble nickasa IDO (h) y el plásmido de doble nickasa IDO (h2) codifican diseños distintos de pares de gRNA dirigidos a IDO1. Puede que esté disponible uno o ambos diseños
- Tras la transfección, la eficacia del knockout puede comprobarse mediante WB, IF ó IHC utilzando el anticuerpo: IDO Anticuerpo (mIDO-48): sc-53978
Información sobre pedidos
| Nombre del producto | Número de catálogo | UNIDAD | Precio | CANTIDAD | Favoritos | |
Plásmido Doble Nickase (h) IDO | sc-400495-NIC | 20 µg | $410.00 | |||
Plásmido Doble Nickase (h2) IDO | sc-400495-NIC-2 | 20 µg | $410.00 |
El IDO1 humano codifica la indoleamina 2,3-dioxigenasa (IDO), una enzima dependiente del hemo que cataliza el primer paso, y el limitante de la velocidad, del catabolismo del triptófano a lo largo de la vía de la quinurenina. Al reducir los niveles locales de triptófano y generar metabolitos de quinurenina con capacidad inmunomoduladora, IDO1 configura la homeostasis inmunitaria, influye en la función de las células T y de las células presentadoras de antígeno, y se entrecruza con redes de señalización inflamatoria. La actividad de IDO1 se ha vinculado a programas de evasión inmunitaria y de tolerancia en diversos contextos patológicos, incluidos la biología del cáncer, la infección crónica y la inflamación asociada a autoinmunidad. Como punto de control metabólico, IDO1 se estudia con frecuencia por sus funciones en el equilibrio redox, las respuestas al estrés y la intercomunicación entre el metabolismo y la regulación inmunitaria.
IDO El plásmido de doble nicasa (h) consiste en un par de plásmidos emparejados diseñados para la edición de alta especificidad del locus IDO1 en líneas celulares human. Cada plásmido expresa una nicasa Cas9 D10A y un ARN guía específico (sgRNA) dirigido a cadenas de ADN opuestas dentro de IDO1. Cuando se dirigen a sitios adyacentes en cadenas de ADN opuestas, las dos nicasas generan cortes en cadena simple desplazados que, juntos, producen una rotura de doble cadena escalonada, lo que requiere una actividad coordinada sobre el objetivo por parte de ambas guías. La rotura de ADN resultante se resuelve mediante vías de reparación celular endógenas, más comúnmente a través de la unión de extremos no homólogos (NHEJ), lo que da lugar a inserciones o deleciones que alteran la función de IDO1. Al requerir la participación de dos ARN guía en el locus diana, el enfoque de doble corte mejora la especificidad de la edición y proporciona una estrategia CRISPR complementaria para aplicaciones en las que se desea un control adicional sobre la precisión de la orientación.
Para facilitar la identificación eficiente de las células editadas, un plásmido codifica GFP para la visualización fluorescente de las poblaciones transfectadas, mientras que el plásmido complementario lleva un gen de resistencia a la puromicina para la selección con antibióticos. En conjunto, estas características facilitan el enriquecimiento eficiente de las poblaciones cotransfectadas y simplifican la validación de los clones con IDO1 alterado.
Sólo para uso en investigación. No destinado a uso diagnóstico o terapéutico.