Não são dados CRISPR: a imagem ilustra a qualidade do anticorpo para visualizar os resultados da experiência CRISPR.
Não são dados CRISPR: a imagem ilustra a qualidade do anticorpo para visualizar os resultados da experiência CRISPR.
IDH2 Plasmídeo duplo de Nickase (h): sc-401417-NIC
- alvos específicos: human
- 20 µg de plasmídeo de DNA pronto para transfecção; Suficiente para até 20 transfecções
- IDH2O plasmídeo de dupla Nickase (h) consiste num par de plasmídeos cada um contem D10A com mutação na nuclease Cas9 nuclease e um alvo especifico de RNA guia com 20 na (gRNA), criado para nocautear a expressão genética com maior especificidade do que o seu correspondente CRISPR/Cas9 KO
- Sequencias pareadas de gRNA são de aproximadamente 20 bp para permitir que os cortes duplos no DNA genômico mediados pela Casp ocorram com especificidade , o que se assemelha ao corte pela DSB
- Cada plasmídeo pertencente ao par de plasmídeos contem um gene de resistência a puromicina para seleção; o outro plasmídeo do par contem um marcador de GFP para a visualização e confirmação da transfecção
- O Plasmídeo Double Nickase IDH2 (h) e o Plasmídeo Double Nickase IDH2 (h2) codificam designs distintos de pares de gRNA direcionados para IDH2. Um ou ambos os desenhos podem estar disponíveis
- Após a transfecção, a eficácia do processo de nocaute genético por ser testada WB, IF ou IHC usando o anticorpo:IDH2 Anticorpo (B-6): sc-374476
Informacoes sobre ordens
| Nome do Produto | Numero de Catalogo | UNID | Preco | Qde | FAVORITOS | |
IDH2 Plasmídeo duplo de Nickase (h) | sc-401417-NIC | 20 µg | $410.00 | |||
IDH2 Plasmídeo duplo de Nickase (h2) | sc-401417-NIC-2 | 20 µg | $410.00 |
IDH2 codifica a isocitrato desidrogenase mitocondrial dependente de NADP, que catalisa a descarboxilação oxidativa do isocitrato em α-cetoglutarato, ao mesmo tempo que produz NADPH. Essa reação dá suporte ao ciclo do ácido tricarboxílico, à homeostase redox mitocondrial e às defesas antioxidantes, mantendo as vias dependentes de NADPH da glutationa e da tioredoxina. A atividade de IDH2 influencia programas de diferenciação celular e a adaptação metabólica sob estresse oxidativo, e a desregulação da função de IDH2 está ligada a alterações no metabolismo do α-cetoglutarato e na regulação epigenética. Mutações recorrentes em IDH2 que geram o oncometabólito 2-hidroxiglutarato estão associadas a padrões aberrantes de metilação de DNA e histonas, tornando IDH2 um nó-chave em estudos de metabolismo do câncer e sinalização mitocondrial.
IDH2 O Plasmídeo de Nickase Dupla (h) consiste num par de plasmídeos combinados, concebidos para a edição de alta especificidade do locus IDH2 em linhas celulares human. Cada plasmídeo expressa uma nickase Cas9 D10A e um sgRNA distinto que tem como alvo cadeias de ADN opostas dentro de IDH2. Quando direcionadas para locais adjacentes em cadeias de ADN opostas, as duas nickases geram cortes deslocados numa única cadeia que, em conjunto, produzem uma quebra escalonada de cadeia dupla, exigindo uma atividade coordenada no alvo por parte de ambas as guias. A quebra de ADN resultante é resolvida por vias de reparação celular endógenas, mais frequentemente através da junção de extremidades não homólogas (NHEJ), levando a inserções ou deleções que perturbam a função IDH2. Ao exigir o envolvimento de dois sgRNA no locus alvo, a abordagem de dupla nickase aumenta a especificidade da edição e fornece uma estratégia CRISPR complementar para aplicações em que se deseja um controlo adicional sobre a precisão do direcionamento.
Para apoiar a identificação eficiente das células editadas, um plasmídeo codifica GFP para visualização fluorescente das populações transfectadas, enquanto o plasmídeo complementar transporta um gene de resistência à puromicina para seleção antibiótica. Em conjunto, estas características apoiam o enriquecimento eficiente das populações co-transfectadas e simplificam a validação dos clones com IDH2 interrompido.
Apenas para uso em investigação. Não se destina a uso diagnóstico ou terapêutico.