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I2PP2A双切口酶质粒(h) | sc-400881-NIC | 20 µg | $410.00 | |||
I2PP2A双切口酶质粒(h2) | sc-400881-NIC-2 | 20 µg | $410.00 |
SET 基因编码 I2PP2A(亦称 SET/TAF-Iβ),这是一种多功能的核内磷酸化蛋白,可抑制蛋白磷酸酶 2A(PP2A),并调控依赖磷酸化的信号传导。I2PP2A 通过与组蛋白及核小体组装因子相互作用,参与染色质组织与表观遗传调控,从而影响转录程序、DNA 复制以及 DNA 损伤应答。SET 通过限制 PP2A 活性,影响 MAPK/ERK、AKT 和细胞周期检查点等通路,塑造细胞增殖与应激信号的输出。SET 的表达或功能失调与磷酸酶平衡及染色质状态的异常相关,这些异常可见于多种癌症以及其他与增殖增强或基因组不稳定相关的表型中。
I2PP2A 双切酶质粒(h)由一对匹配的质粒组成,专为在 human 细胞系中对 SET 位点进行高特异性编辑而设计。每个质粒分别表达Cas9 D10A切口酶和针对SET内不同DNA链的独特sgRNA。当这两种切口酶被引导至相邻但位于DNA链相反侧的位点时,会产生错位的单链切口,从而共同形成错位双链断裂,这需要两个引导RNA在靶位点上协同发挥作用。由此产生的DNA断裂通过内源性细胞修复途径(最常见的是非同源末端连接(NHEJ))得到修复,从而导致插入或缺失,进而破坏SET的功能。通过要求双sgRNA在靶位点结合,双切口方法提高了编辑特异性,并为需要对靶向精度进行额外控制的应用提供了互补的CRISPR策略。
为高效识别编辑后的细胞,其中一个质粒编码GFP以实现转染细胞群的荧光可视化,而配套质粒则携带嘌呤霉素抗性基因用于抗生素筛选。这些特性共同支持共转染细胞群的高效富集,并简化了SET基因失活克隆的验证流程。
仅供研究使用。不用于诊断或治疗。