Plasmide Double Nickase (h) HoxC4: sc-405942-NIC
- Espèces cibles: human
- 20 µg d'ADN plasmidique purifié et prêt à transfecter; Jusqu'à 20 transfections
- Le Plasmide Double Nickase (h) HoxC4 correspond à une paire de plasmides chacun codant la nucléase Cas9 mutante D10A et un ARN guide (gARN) cible de 20 nt specifique, élaboré pour le knockout optimal de l'expression d'un gène avec une plus grande spécificité que le plasmide KO CRISPR/Cas9 correspondant.
- Les séquences des paires d'ARNg sont décalées de 20 pb environ pour induire avec la Cas9 une double entaille spécifique de l'ADN génomique, qui imite un DSB
- L'un des plasmides de la paire contient un gène de résistance à la puromycine; l'autre plasmide de la paire contient un marqueur GFP pour confirmer visuellement la transfection
- Le plasmide HoxC4 Double Nickase (h) et le plasmide HoxC4 Double Nickase (h2) codent pour des paires distinctes de gRNA ciblant HOXC4. Un ou les deux modèles peuvent être disponibles
- Après transfection, l'efficacité de knockout de gène peut être évaluée par WB, IF ou IHC en utilisant l'anticorps: HoxC4 Antibody (G-12): sc-398460
Informations pour la commande
| Nom du produit | Ref. Catalogue | COND. | Prix HT | QTÉ | Favoris | |
Plasmide Double Nickase (h) HoxC4 | sc-405942-NIC | 20 µg | $410.00 |
HOXC4 code le facteur de transcription à homéoboîte HoxC4, un régulateur se liant à l’ADN qui contribue à établir l’identité positionnelle et à coordonner des programmes d’expression génique lors de la mise en place du plan embryonnaire et de la différenciation tissulaire. Au sein des réseaux transcriptionnels dépendants des gènes HOX, HoxC4 influence les états de la chromatine et de la transcription qui gouvernent l’engagement de lignée, la prolifération et la morphogenèse. Une expression dérégulée de HOXC4 a été associée à des états de différenciation altérés et à un remaniement transcriptionnel observés dans des troubles du développement et dans de multiples contextes cancéreux, ce qui étaye son utilisation comme nœud moléculaire dans les études de la régulation génique oncogénique. Le gène humain HOXC4 est également étudié pour ses interactions avec des cofacteurs modulant l’activité des promoteurs et des enhancers, permettant d’interroger à l’échelle des voies les circuits régulateurs pilotés par les homéoboîtes.
HoxC4 Le plasmide double nickase (h) se compose d'une paire de plasmides appariés, conçus pour une édition hautement spécifique du locus HOXC4 dans les lignées cellulaires human. Chaque plasmide exprime une nickase Cas9 D10A et un sgRNA distinct ciblant des brins d'ADN opposés au sein de HOXC4. Lorsqu'elles sont dirigées vers des sites adjacents sur des brins d'ADN opposés, les deux nickases génèrent des cassures simple brin décalées qui, ensemble, produisent une cassure double brin décalée, nécessitant une activité coordonnée sur la cible de la part des deux guides. La cassure d'ADN qui en résulte est résolue par les voies de réparation cellulaires endogènes, le plus souvent par jonction non homologue (NHEJ), ce qui conduit à des insertions ou des délétions qui perturbent la fonction de HOXC4. En nécessitant l'engagement de deux ARNsg au locus cible, l'approche par double nick améliore la spécificité de l'édition et offre une stratégie CRISPR complémentaire pour les applications où un contrôle supplémentaire de la précision du ciblage est souhaité.
Afin de faciliter l'identification efficace des cellules éditées, un plasmide code pour la GFP permettant la visualisation par fluorescence des populations transfectées, tandis que le plasmide compagnon porte un gène de résistance à la puromycine pour la sélection antibiotique. Ensemble, ces caractéristiques favorisent l'enrichissement efficace des populations co-transfectées et simplifient la validation des clones présentant une perturbation de HOXC4.
Réservé à la recherche. N'est pas destiné à un usage diagnostique ou thérapeutique.