HoxA10 Double Nickase Plasmid (h): sc-401463-NIC

HOXA10 kodiert den Homeobox-Transkriptionsfaktor HoxA10, einen sequenzspezifischen DNA-bindenden Regulator, der durch die Steuerung abstammungsbestimmender Gennetzwerke die embryonale Musterbildung und die Homöostase adulten Gewebes koordiniert. In hämatopoetischen und mesenchymalen Kontexten integriert HoxA10 entwicklungsbiologische Signalprogramme, um Proliferation, Differenzierung, Adhäsion und den Umbau der extrazellulären Matrix zu modulieren, mit nachgeschalteten Effekten auf Signalwege der Zellzyklus- und Transkriptionsregulation. Eine dysregulierte HOXA10-Expression oder veränderte regulatorische Schaltkreise wurden mit gestörter myeloischer Reifung und der breiteren, in malignitätsassoziierten Zuständen beobachteten transkriptionellen Reprogrammierung in Verbindung gebracht, was HOXA10 zu einem nützlichen Knotenpunkt für die Untersuchung entwicklungsbezogener Genkontrolle in krankheitsrelevanten Modellen macht. In der Reproduktionsbiologie trägt HOXA10 zur endometrialen Differenzierung und zu Programmen der uterinen Rezeptivität bei und unterstützt damit Untersuchungen hormonresponsiver Transkriptionsnetzwerke.

HoxA10 Das Double-Nickase-Plasmid (h) besteht aus einem aufeinander abgestimmten Plasmidpaar, das für die hochspezifische Bearbeitung des HOXA10-Lokus in human-Zelllinien entwickelt wurde. Jedes Plasmid exprimiert eine Cas9-D10A-Nickase und eine spezifische sgRNA, die auf entgegengesetzte DNA-Stränge innerhalb von HOXA10 abzielt. Wenn sie auf benachbarte Stellen auf entgegengesetzten DNA-Strängen gerichtet sind, erzeugen die beiden Nickasen versetzte Einzelstrang-Schnitte, die zusammen einen versetzten Doppelstrangbruch erzeugen, was eine koordinierte On-Target-Aktivität beider Guides erfordert. Der resultierende DNA-Bruch wird durch endogene zelluläre Reparaturwege behoben, meist durch nicht-homologe Endverknüpfung (NHEJ), was zu Insertionen oder Deletionen führt, die die HOXA10-Funktion stören. Durch die Notwendigkeit einer doppelten sgRNA-Bindung am Zielort erhöht der Doppel-Nick-Ansatz die Spezifität der Bearbeitung und bietet eine komplementäre CRISPR-Strategie für Anwendungen, bei denen eine zusätzliche Kontrolle über die Zielgenauigkeit gewünscht ist.

Um eine effiziente Identifizierung editierter Zellen zu unterstützen, kodiert ein Plasmid GFP zur fluoreszierenden Visualisierung transfizierter Populationen, während das Begleitplasmid ein Puromycin-Resistenzgen für die Antibiotika-Selektion trägt. Zusammen unterstützen diese Merkmale eine effiziente Anreicherung co-transfizierter Populationen und vereinfachen die Validierung von Klonen mit HOXA10-Störung.

Nur für Forschungszwecke. Nicht für diagnostische oder therapeutische Zwecke bestimmt.