HMG-20A Plásmido CRISPR/Cas9 KO (h): sc-407302
- Especies Diana: human
- 20 µg de plásmido de ADN purificado listo para la trasfección; suficiente para 20 transfecciones máximo
- HMG-20A El plásmido CRISPR/Cas9 Knockout (KO) (h) es un conjunto de plásmidos, cada uno de los cuales codifica la nucleasa Cas9 y un ARN guía (gRNA) de 20 nt específico para el objetivo, diseñado para lograr la máxima eficiencia de knockout utilizando secuencias derivadas de la biblioteca GeCKO v2
- Las secuencias de gRNA dirigen a Cas9 para que induzca roturas de doble cadena (DSB) específicas en el locus genómico HMG-20A, lo que da lugar a la inactivación del gen mediante unión de extremos no homólogos (NHEJ)
- Los genes de resistencia a la puromicina y RFP están flanqueados por sitios LoxP, lo que permite la eliminación de los marcadores de selección mediante la recombinasa Cre (Vector Cre: sc-418923) tras el establecimiento de líneas celulares knockout estables
- Tras la transfección, la eficacia del knockout puede comprobarse mediante WB, IF ó IHC utilzando el anticuerpo: HMG-20A Anticuerpo (D-5): sc-393028
Información sobre pedidos
| Nombre del producto | Número de catálogo | UNIDAD | Precio | CANTIDAD | Favoritos | |
HMG-20A Plásmido CRISPR/Cas9 KO (h) | sc-407302 | 20 µg | $397.00 |
Descripción general
HMG20A codifica HMG-20A, un factor asociado a la cromatina similar a las proteínas del grupo de alta movilidad (HMG) que contribuye a la regulación transcripcional al influir en la organización de los nucleosomas y en el acceso de complejos reguladores al ADN. Se ha implicado en el control epigenético de programas de linaje, incluida la expresión génica del neurodesarrollo, mediante interacciones con la maquinaria de remodelación de la cromatina y de modificación de histonas. Al modular la actividad de promotores y potenciadores (enhancers), HMG-20A puede afectar el control del ciclo celular, la diferenciación y el mantenimiento de la identidad celular. La alteración de la regulación de los estados de cromatina vinculados a HMG20A es relevante para estudios de fenotipos neurológicos y de desregulación transcripcional asociada al cáncer.
El plásmido CRISPR/Cas9 KO HMG-20A (h) es un conjunto de plásmidos diseñado para la interrupción dirigida del gen HMG20A en líneas celulares human. Cada plásmido coexpresa un ARN guía único (sgRNA) dirigido a un sitio distinto dentro del HMG20A junto con la nucleasa Cas9 de Streptococcus pyogenes. Los plásmidos también codifican GFP, lo que permite la identificación fluorescente y el enriquecimiento de las células transfectadas con éxito mediante microscopía de fluorescencia o citometría de flujo.
El diseño multiguía aumenta la probabilidad de generar inserciones o deleciones (indeles) que interrumpan el marco de lectura abierto de HMG20A tras la formación de roturas de doble cadena mediadas por Cas9. Las roturas de ADN introducidas por el sistema CRISPR/Cas9 se reparan a través de vías endógenas de unión de extremos no homólogos (NHEJ), lo que con frecuencia da lugar a mutaciones de desplazamiento del marco de lectura que anulan la expresión de la proteína HMG-20A.
Este sistema de knockout CRISPR permite la generación eficiente de modelos celulares deficientes en HMG20A para la investigación de la señalización de HMG-20A, estudios de genómica funcional, investigación en biología del cáncer y evaluación de respuestas terapéuticas en líneas celulares humanas.
Características principales
- sgRNA dirigidos a los exones de HMG20A críticos para la función de HMG-20A
Coexpresión de SpCas9 y sgRNA a partir de un único plásmido para simplificar la administración
Reportero GFP para la identificación de células transfectadas
Conjunto de plásmidos dirigidos a múltiples sitios genómicos de HMG20A para mejorar la eficiencia del knockout
Compatible con la administración mediante transfección
Variantes de diseño
CRISPRs +/- HDRs
- Los gRNA codificados por el plásmido HMG-20A CRISPR/Cas9 KO (h) y el plásmido HMG-20A CRISPR/Cas9 KO (h2) se dirigen a sitios distintos dentro del locus HMG20A. Puede estar disponible uno o ambos diseños de orientación. Consulte «Productos relacionados» para conocer la disponibilidad.
Las construcciones donantes HDR codificadas por el plásmido HDR HMG-20A (h) y el plásmido HDR HMG-20A (h2) contienen un casete de resistencia a la puromicina y un reportero RFP flanqueado por brazos de homología HMG20A para facilitar la reparación dirigida por homología en sitios diana HMG20A definidos que se corresponden con los diseños de KO de CRISPR/Cas9. La disponibilidad de los donantes HDR puede variar. Consulte «Productos relacionados» para conocer la disponibilidad.
Sólo para uso en investigación. No destinado a uso diagnóstico o terapéutico.