Não são dados CRISPR: a imagem ilustra a qualidade do anticorpo para visualizar os resultados da experiência CRISPR.
Não são dados CRISPR: a imagem ilustra a qualidade do anticorpo para visualizar os resultados da experiência CRISPR.
hippocalcin Plasmídeo CRISPR/Cas9 KO (m): sc-420938
- alvos específicos: mouse
- 20 µg de plasmídeo de DNA pronto para transfecção; Suficiente para até 20 transfecções
- hippocalcin O Plasmídeo CRISPR/Cas9 Knockout (KO) (m) é um conjunto de plasmídeos, cada um codificando a nuclease Cas9 e um RNA guia (gRNA) de 20 nt específico para o alvo, concebido para uma eficiência máxima de knockout utilizando sequências derivadas da biblioteca GeCKO v2
- As sequências de gRNA direcionam a Cas9 para induzir quebras de cadeia dupla (DSBs) específicas do local no locus genómico hippocalcin, resultando no knockout do gene através da junção de extremidades não homólogas (NHEJ)
- Os genes de resistência à puromicina e RFP são flanqueados por sítios LoxP, permitindo a remoção de marcadores de seleção através da recombinase Cre (Cre Vector: sc-418923) após o estabelecimento de linhas celulares knockout estáveis
- Após a transfecção, a eficácia do processo de nocaute genético por ser testada WB, IF ou IHC usando o anticorpo:hippocalcin Anticorpo (G-8): sc-393125
Informacoes sobre ordens
| Nome do Produto | Numero de Catalogo | UNID | Preco | Qde | FAVORITOS | |
hippocalcin Plasmídeo CRISPR/Cas9 KO (m) | sc-420938 | 20 µg | $397.00 |
Visão geral
Hpca codifica a hipocalcina, uma proteína neuronal ligante de cálcio do tipo EF-hand, da família de sensores neuronais de cálcio, que acopla transientes de Ca2+ a alterações na sinalização sináptica e na excitabilidade. Após a ligação ao Ca2+, a hipocalcina sofre uma mudança conformacional que pode modular sua associação à membrana e influenciar processos como plasticidade sináptica, tráfego dependente de atividade e programas de expressão gênica em neurônios. Ela participa de redes de sinalização dependentes de cálcio que se cruzam com vias de receptores de neurotransmissores e com cascatas downstream de quinases/fosfatases que moldam a potenciação e a depressão de longa duração. A homeostase neuronal de Ca2+ desregulada e a função alterada de sensores de cálcio são relevantes para estudos mecanísticos de fenótipos cognitivos e de disfunção de circuitos associada a doenças neurodegenerativas ou neuropsiquiátricas em modelos murinos.
O Plasmídeo CRISPR/Cas9 KO hippocalcin (m) é um conjunto de plasmídeos concebido para a interrupção direcionada do gene Hpca em linhas celulares mouse. Cada plasmídeo coexpressa um RNA guia único (sgRNA) direcionado a um local distinto dentro do Hpca, juntamente com a nuclease Cas9 de Streptococcus pyogenes. Os plasmídeos também codificam GFP, permitindo a identificação fluorescente e o enriquecimento de células transfectadas com sucesso por microscopia de fluorescência ou citometria de fluxo.
O design multiguia aumenta a probabilidade de gerar inserções ou deleções (indels) que interrompem o quadro de leitura aberto do Hpca na sequência da formação de quebras de cadeia dupla mediadas por Cas9. As quebras de ADN introduzidas pelo sistema CRISPR/Cas9 são reparadas através de vias endógenas de junção de extremidades não homólogas (NHEJ), resultando frequentemente em mutações de deslocamento de quadro que abolir a expressão da proteína hippocalcin.
Este sistema de knockout CRISPR permite a geração eficiente de modelos celulares com deficiência de Hpca para a investigação da sinalização de hippocalcin, estudos de genómica funcional, investigação em biologia do cancro e avaliação de respostas terapêuticas em linhas celulares humanas.
Características principais
- sgRNAs direcionados para o(s) exão(ões) Hpca críticos para a função hippocalcin
Coexpressão de SpCas9 e sgRNA a partir de um único plasmídeo para simplificar a administração
Repórter GFP para identificação de células transfectadas
Conjunto de plasmídeos direcionados para múltiplos locais genómicos Hpca para melhorar a eficiência do knockout
Compatível com administração por transfecção
Variantes de Design
CRISPRs +/- HDRs
- Os gRNAs codificados pelo hippocalcin Plasmídeo CRISPR/Cas9 KO (m) e pelo hippocalcin Plasmídeo CRISPR/Cas9 KO (m2) têm como alvo locais distintos dentro do locus Hpca. Pode estar disponível um ou ambos os designs de alvo. Consulte Produtos Relacionados para verificar a disponibilidade.
As construções doadoras HDR codificadas pelo hippocalcin Plasmídeo HDR (m) e o Plasmídeo HDR hippocalcin (m2) contêm uma cassete de resistência à puromicina e um repórter RFP flanqueado por braços de homologia Hpca para suportar a reparação dirigida por homologia em locais-alvo Hpca definidos, correspondentes aos desenhos de KO CRISPR/Cas9. A disponibilidade do doador HDR pode variar. Consulte Produtos Relacionados para verificar a disponibilidade.
Apenas para uso em investigação. Não se destina a uso diagnóstico ou terapêutico.