Hepatic Lipase Double Nickase Plasmid (h): sc-403928-NIC
- Zielspezies: human
- 20 µg transfektionsfertige, aufgereinigte Plasmid DNA; geeignet für 20 Transfektionen
- Das Hepatic Lipase Double Nickase Plasmid (h) wird als Plasmid-Paar geliefert. Die einzelnen Plasmide kodieren für eine D10A mutierte Cas9 Nuklease sowie für je eine unterschiedliche, zielspezifische 20nt guide RNA (gRNA) Sequenz. Dies erlaubt eine hohe Knockout-Effizienz bei gleichzeitig größerer Spezifität als das entsprechende CRISPR/Cas9 KO Plasmid
- gRNA Sequenzpaare liegen ca. 20 bp auseinander um ein spezifisches Cas9-vermitteltes "Double Nicking" der genomischen DNA zu erlauben und so im Resultat den Effekt eines Doppelstrangbruchs nachzuahmen.
- Ein Plasmid kodiert für ein Puromycin-Resistenzgen zur Selektion von stabilen Knockout-Zellen. Das andere Plasmid kodiert für ein GFP-Gen für den visuellen Nachweis der Transfektion
- Hepatic Lipase Double-Nickase-Plasmid (h) und Hepatic Lipase Double-Nickase-Plasmid (h2) kodieren unterschiedliche gepaarte gRNA-Designs, die auf LIPC abzielen. Möglicherweise ist eines oder sind beide Designs verfügbar
- Nach der Transfektion kann die Effizienz des Gen-Knockouts per Western Blot oder histologisch mit folgendem Antikörper überprüft werden: Hepatic Lipase: sc-21740
Bestellinformation
| Produkt | Katalog # | EINHEIT | Preis | ANZAHL | Favoriten | |
Hepatic Lipase Double Nickase Plasmid (h) | sc-403928-NIC | 20 µg | $410.00 | |||
Hepatic Lipase Double Nickase Plasmid (h2) | sc-403928-NIC-2 | 20 µg | $410.00 |
Das humane **LIPC**-Gen kodiert die hepatische Lipase, eine am Endothel gebundene Triglyzeridlipase, die Triglyzeride und Phospholipide in zirkulierenden Lipoproteinen hydrolysiert und dadurch das HDL-Remodeling sowie die Umwandlung von IDL zu LDL beeinflusst. Durch die Regulation von Lipoproteinzusammensetzung und -clearance verknüpft die hepatische Lipase den Lipidtransport mit hepatischen Aufnahmewegen und trägt zur systemischen Energiehomöostase bei. Eine veränderte **LIPC**-Aktivität oder -Expression wurde mit Dyslipidämie-Phänotypen in Verbindung gebracht, darunter Änderungen der HDL-Cholesterinspiegel und der Verteilung von Lipidpartikeln, was **LIPC** zu einem nützlichen Ziel für mechanistische Studien des Lipidstoffwechsels macht. **LIPC** wird außerdem im Kontext kardiometabolischer Risikopfadwege sowie von Gen-Umwelt-Interaktionen auf Plasma-Lipidprofile untersucht.
Hepatic Lipase Das Double-Nickase-Plasmid (h) besteht aus einem aufeinander abgestimmten Plasmidpaar, das für die hochspezifische Bearbeitung des LIPC-Lokus in human-Zelllinien entwickelt wurde. Jedes Plasmid exprimiert eine Cas9-D10A-Nickase und eine spezifische sgRNA, die auf entgegengesetzte DNA-Stränge innerhalb von LIPC abzielt. Wenn sie auf benachbarte Stellen auf entgegengesetzten DNA-Strängen gerichtet sind, erzeugen die beiden Nickasen versetzte Einzelstrang-Schnitte, die zusammen einen versetzten Doppelstrangbruch erzeugen, was eine koordinierte On-Target-Aktivität beider Guides erfordert. Der resultierende DNA-Bruch wird durch endogene zelluläre Reparaturwege behoben, meist durch nicht-homologe Endverknüpfung (NHEJ), was zu Insertionen oder Deletionen führt, die die LIPC-Funktion stören. Durch die Notwendigkeit einer doppelten sgRNA-Bindung am Zielort erhöht der Doppel-Nick-Ansatz die Spezifität der Bearbeitung und bietet eine komplementäre CRISPR-Strategie für Anwendungen, bei denen eine zusätzliche Kontrolle über die Zielgenauigkeit gewünscht ist.
Um eine effiziente Identifizierung editierter Zellen zu unterstützen, kodiert ein Plasmid GFP zur fluoreszierenden Visualisierung transfizierter Populationen, während das Begleitplasmid ein Puromycin-Resistenzgen für die Antibiotika-Selektion trägt. Zusammen unterstützen diese Merkmale eine effiziente Anreicherung co-transfizierter Populationen und vereinfachen die Validierung von Klonen mit LIPC-Störung.
Nur für Forschungszwecke. Nicht für diagnostische oder therapeutische Zwecke bestimmt.