HECTD1 CRISPR/Cas9 케이오 플라스미드 (h): sc-409864

개요

HECTD1은 기질 단백질의 유비퀴틴화를 매개하는 HECT형 E3 유비퀴틴 리가아제를 암호화하며, 다양한 세포 환경에서 단백질 항상성(proteostasis), 단백질 턴오버, 그리고 신호의 강도(진폭)를 조절합니다. 경로 구성요소의 유비퀴틴 의존적 수송과 분해를 조절함으로써 HECTD1은 단백질 네트워크의 적시 재구성이 필요한 세포주기 진행, 스트레스 반응, 세포골격 역학과 같은 과정에 영향을 줄 수 있습니다. E3 리가아제 활성이 비정상적으로 조절되면 신호 전달의 정확성이 변하고 비정상적인 세포 표현형이 나타나는 경우가 많아, HECTD1은 인간 세포에서 유비퀴틴–프로테아좀 시스템 기능을 연구하는 데 중요한 지점(노드)이 됩니다. HECTD1에 대한 연구는 유비퀴틴화가 발생 및 질환과 연관된 신호 프로그램과 어떻게 맞물리는지에 대한 기전적 규명을 뒷받침합니다.

HECTD1 CRISPR/Cas9 KO 플라스미드 (h)는 human 세포주에서 HECTD1 유전자의 표적 파괴를 위해 설계된 플라스미드 풀입니다. 각 플라스미드는 HECTD1 유전자 내의 서로 다른 부위를 표적으로 하는 고유한 단일 가이드 RNA(sgRNA)와 Streptococcus pyogenes Cas9 뉴클레아제를 함께 발현합니다. 또한 이 플라스미드들은 GFP를 암호화하여, 형광 현미경이나 유세포 분석기를 통해 성공적으로 형질전환된 세포를 형광으로 식별하고 농축할 수 있게 합니다.

다중 가이드 설계는 Cas9에 의한 이중 가닥 절단 형성 후 HECTD1의 개방 독서 틀(ORF)을 파괴하는 삽입 또는 결실(indel)이 발생할 가능성을 높입니다. CRISPR/Cas9 시스템에 의해 유발된 DNA 절단은 내인성 비동종 말단 결합(NHEJ) 경로를 통해 복구되며, 이는 종종 HECTD1 단백질 발현을 소멸시키는 프레임 시프트 돌연변이를 초래합니다.

이 CRISPR 녹아웃 시스템은 HECTD1 신호 전달 연구, 기능 유전체학 연구, 암 생물학 연구 및 인간 세포주에서의 치료 반응 평가를 위한 HECTD1 결핍 세포 모델을 효율적으로 생성할 수 있게 합니다.

주요 특징

• HECTD1 기능에 중요한 HECTD1 엑손을 표적하는 sgRNA
  전달을 단순화하기 위해 단일 플라스미드에서 SpCas9 및 sgRNA의 공동 발현
  형질전환된 세포 식별을 위한 GFP 리포터
  녹아웃 효율 향상을 위해 여러 HECTD1 게놈 부위를 표적하는 플라스미드 풀
  형질전환을 통한 전달과 호환

설계 변형

CRISPRs +/- HDR

• HECTD1 CRISPR/Cas9 KO 플라스미드 (h) 및 HECTD1 CRISPR/Cas9 KO 플라스미드 (h2)에 의해 암호화되는 gRNA는 HECTD1 유전자좌 내의 서로 다른 부위를 표적화합니다. 표적화 설계 중 하나 또는 둘 다 이용 가능할 수 있습니다. 구입 가능 여부는 관련 제품을 참조하십시오.
  HECTD1 HDR 플라스미드 (h) 및 HECTD1 HDR 플라스미드 (h2)에 의해 암호화되는
  HDR 기증자 컨스트럭트는 푸로마이신 내성 카세트와 RFP 리포터를 포함하며, 이는 CRISPR/Cas9 KO 설계에 해당하는 정의된 HECTD1 표적 부위에서의 상동성 유도 복구를 지원하기 위해 HECTD1 상동성 암으로 둘러싸여 있습니다. HDR 기증자의 재고 여부는 달라질 수 있습니다. 재고 여부는 관련 제품을 참조하십시오.

연구용으로만 사용하세요. 진단 또는 치료용이 아닙니다.