hDcp2 Lentiviral Activation Particles (h): sc-418511-LAC

DCP2 kodiert das menschliche mRNA-Decapping-Enzym hDcp2, eine zentrale Komponente des zytoplasmatischen mRNA-Umsatzes, die die 5′-Cap-Struktur entfernt und damit den 5′→3′-Abbau einleitet. Durch seine Funktion im Decapping-Komplex zusammen mit Kofaktoren wie DCP1 und Decapping-Aktivatoren trägt hDcp2 zur RNA-Qualitätskontrolle, zur Dynamik von Processing Bodies (P-Bodies) und zur Umgestaltung des Transkriptoms nach Stressantworten sowie signalabhängigen Veränderungen der Genexpression bei. Der von DCP2 regulierte Abbau ist mit Signalwegen verknüpft, die Translation, RNA-Überwachung und die zelluläre Anpassung an Umweltreize steuern, was DCP2 für Studien zur posttranskriptionellen Regulation relevant macht. Verändertes mRNA-Decapping und eine dysregulierte RNA-Stabilität wurden mit krankheitsassoziierten Genexpressionsprogrammen in Verbindung gebracht, was die Untersuchung von DCP2 in Modellen onkogener Signalgebung, der Neurobiologie und von Wirt–Pathogen-Interaktionen unterstützt.

hDcp2 Lentivirale Aktivierungspartikel (h) erfüllen diesen Bedarf, indem sie das vollständige Transkriptionsaktivierungssystem des Synergistic Activation Mediator (SAM) in transduktionsbereite, hoch-titrige lentivirale Partikel verpacken und so eine effiziente DCP2-Hochregulation über ein breiteres Spektrum menschlicher Zelltypen ermöglichen.

hDcp2 Lentivirale Aktivierungspartikel (h) liefern alle funktionellen Komponenten des Synergistic Activation Mediator (SAM)-Systems über lentivirale Transduktion. Das System umfasst drei Partikelpräparate, die gemeinsam in Zielzellen transduziert werden: eines, das für katalytisch inaktives dCas9 (Mutationen D10A und N863A) kodiert, das mit der VP64-Transaktivierungsdomäne und einem Blasticidin-Resistenzgen fusioniert ist; eines, das für das MS2-p65-HSF1-Fusionsprotein mit einem Hygromycin-Resistenzgen kodiert; und eines, das für eine zielspezifische 20-nt-sgRNA kodiert, die an zwei MS2-RNA-Aptamere mit einem Puromycin-Resistenzgen fusioniert ist. Nach der lentiviralen Transduktion und der genomischen Integration der Expressionskassetten werden die SAM-Komponenten stabil exprimiert und lagern sich am Zielort innerhalb der proximalen Promotorregion stromaufwärts der DCP2-Transkriptionsstartstelle an, wo VP64, p65 und HSF1 kooperativ wirken, um endogene Transkriptionsmaschinerie zu rekrutieren und eine anhaltende Hochregulation der endogenen hDcp2-Expression zu bewirken. Die Verwendung von nuklease-inaktivem dCas9 verhindert die Einführung von Doppelstrangbrüchen in der DNA und bewahrt den nativen DCP2-Genomlokus sowie die regulatorische Architektur.

Das lentivirale Format bietet mehrere praktische Vorteile: Die stabile genomische Integration unterstützt eine vererbbare Aktivierung über Zellteilungen hinweg; Partikelpräparate mit hohem Titer machen eine eigene Virusproduktion überflüssig; und die Kompatibilität mit primären, sich nicht teilenden und transfektionsresistenten Zelltypen erweitert die experimentellen Möglichkeiten. Eine erfolgreiche Transduktion kann durch eine dreifache Antibiotika-Selektion mit Puromycin, Hygromycin und Blasticidin bestätigt und verstärkt werden.

Nur für Forschungszwecke. Nicht für diagnostische oder therapeutische Zwecke bestimmt.