GRP 75 Lentiviral Activation Particles (h): sc-400471-LAC

HSPA9はGRP75（モータリン）をコードしており、ミトコンドリアに関連するHSP70ファミリーのシャペロンとして、ミトコンドリア・マトリックス内およびミトコンドリア—小胞体（ER）接触部位におけるタンパク質の取り込み、フォールディング、ならびにプロテオスタシスの維持を支えます。GRP75はミトコンドリアの生合成と品質管理に寄与し、ストレス応答をエネルギー代謝と統合するとともに、p53シグナル伝達や酸化ストレス関連ネットワークなどの経路との相互作用を介して、アポトーシスや細胞老化を調節します。HSPA9/GRP75機能の変化はミトコンドリア機能障害の表現型と関連づけられており、神経変性、造血不全症候群、がん細胞代謝などの文脈で研究されています。細胞のストレス耐性を担う中心的な調節因子として、GRP75はミトコンドリア動態、活性酸素種（ROS）の制御、ならびにミトコンドリア関連膜（MAM）シグナル伝達における役割の観点からもしばしば検討されています。

GRP 75 レンチウイルス活性化粒子（h）は、完全な相乗的活性化メディエーター（SAM）転写活性化システムを、トランスダクション可能な高力価レンチウイルス粒子に封入することでこのニーズに対応し、より広範なヒト細胞タイプにおいて効率的なHSPA9の発現上昇を可能にします。

GRP 75 レンチウイルス活性化粒子（h）は、レンチウイルス媒介を介して、シナジー活性化メディエーター（SAM）システムのすべての機能的構成要素を届ける。このシステムは、標的細胞へ共導入される3種類の粒子製剤で構成されています。1つは、VP64転写活性化ドメインとブラスティシジン耐性遺伝子を融合させた、触媒活性のないdCas9（D10AおよびN863A変異）をコードするものです。ヒグロマイシン耐性遺伝子を有するMS2-p65-HSF1融合タンパク質をコードするもの；および、2つのMS2 RNAアプタマーと融合した標的特異的20塩基対sgRNAをコードし、プロマイシン耐性遺伝子を有するもの。レンチウイルスによる導入および発現カセットのゲノムへの組み込み後、SAM構成要素は安定して発現し、HSPA9転写開始点の上流にある近位プロモーター領域内の標的座に集合する。そこでは、VP64、p65、およびHSF1が協調して作用し、内因性の転写機構を動員して、内因性GRP 75の発現を持続的に上向きに調節する。ヌクレアーゼ不活性型dCas9を使用することで、二本鎖DNA切断の導入を回避し、天然のHSPA9ゲノム座および制御機構を維持します。

レンチウイルス形式には、いくつかの実用的な利点があります。安定したゲノム組み込みにより、細胞分裂を経ても遺伝的に継承される活性化がサポートされます。高力価の粒子調製により、施設内でのウイルス生産の必要性がなくなります。また、初代培養細胞、非増殖性細胞、およびトランスフェクション抵抗性細胞との互換性により、実験の適用範囲が広がります。成功したトランスダクションは、プロマイシン、ハイグロマイシン、ブラスティシジンを用いた三重抗生物質選別により確認および選別が可能である。

研究用のみ。診断用または治療用ではありません。