Glucose Transporter Glut3 Plásmido CRISPR/Cas9 KO (m): sc-423000

Descripción general

Slc2a3 codifica el transportador facilitador de glucosa de alta afinidad GLUT3, una vía principal para la captación basal de glucosa en células de ratón con elevada demanda metabólica, incluidas las neuronas y las poblaciones inmunitarias activadas. Al regular la disponibilidad intracelular de glucosa, GLUT3 sostiene el flujo glucolítico, la producción de ATP y las rutas biosintéticas que acoplan la detección de nutrientes con la supervivencia y la proliferación celular. Una actividad alterada de GLUT3 puede modificar el equilibrio redox y las redes de señalización metabólica como AMPK y mTOR, afectando las respuestas al estrés y los programas de diferenciación. El transporte de glucosa desregulado se analiza con frecuencia en contextos de neurobiología, inflamación y fenotipos de enfermedades impulsadas por el metabolismo, donde los cambios en la utilización de la glucosa contribuyen a la fisiopatología.

El plásmido CRISPR/Cas9 KO Glucose Transporter Glut3 (m) es un conjunto de plásmidos diseñado para la interrupción dirigida del gen Slc2a3 en líneas celulares mouse. Cada plásmido coexpresa un ARN guía único (sgRNA) dirigido a un sitio distinto dentro del Slc2a3 junto con la nucleasa Cas9 de Streptococcus pyogenes. Los plásmidos también codifican GFP, lo que permite la identificación fluorescente y el enriquecimiento de las células transfectadas con éxito mediante microscopía de fluorescencia o citometría de flujo.

El diseño multiguía aumenta la probabilidad de generar inserciones o deleciones (indeles) que interrumpan el marco de lectura abierto de Slc2a3 tras la formación de roturas de doble cadena mediadas por Cas9. Las roturas de ADN introducidas por el sistema CRISPR/Cas9 se reparan a través de vías endógenas de unión de extremos no homólogos (NHEJ), lo que con frecuencia da lugar a mutaciones de desplazamiento del marco de lectura que anulan la expresión de la proteína Glucose Transporter Glut3.

Este sistema de knockout CRISPR permite la generación eficiente de modelos celulares deficientes en Slc2a3 para la investigación de la señalización de Glucose Transporter Glut3, estudios de genómica funcional, investigación en biología del cáncer y evaluación de respuestas terapéuticas en líneas celulares humanas.

Características principales

• sgRNA dirigidos a los exones de Slc2a3 críticos para la función de Glucose Transporter Glut3
  Coexpresión de SpCas9 y sgRNA a partir de un único plásmido para simplificar la administración
  Reportero GFP para la identificación de células transfectadas
  Conjunto de plásmidos dirigidos a múltiples sitios genómicos de Slc2a3 para mejorar la eficiencia del knockout
  Compatible con la administración mediante transfección

Variantes de diseño

CRISPRs +/- HDRs

• Los gRNA codificados por el plásmido Glucose Transporter Glut3 CRISPR/Cas9 KO (m) y el plásmido Glucose Transporter Glut3 CRISPR/Cas9 KO (m2) se dirigen a sitios distintos dentro del locus Slc2a3. Puede estar disponible uno o ambos diseños de orientación. Consulte «Productos relacionados» para conocer la disponibilidad.
  Las construcciones donantes HDR codificadas por el plásmido HDR Glucose Transporter Glut3 (m) y el plásmido HDR Glucose Transporter Glut3 (m2) contienen un casete de resistencia a la puromicina y un reportero RFP flanqueado por brazos de homología Slc2a3 para facilitar la reparación dirigida por homología en sitios diana Slc2a3 definidos que se corresponden con los diseños de KO de CRISPR/Cas9. La disponibilidad de los donantes HDR puede variar. Consulte «Productos relacionados» para conocer la disponibilidad.

Sólo para uso en investigación. No destinado a uso diagnóstico o terapéutico.