Plasmide Double Nickase (h) GILZ: sc-401424-NIC
- Espèces cibles: human
- 20 µg d'ADN plasmidique purifié et prêt à transfecter; Jusqu'à 20 transfections
- Le Plasmide Double Nickase (h) GILZ correspond à une paire de plasmides chacun codant la nucléase Cas9 mutante D10A et un ARN guide (gARN) cible de 20 nt specifique, élaboré pour le knockout optimal de l'expression d'un gène avec une plus grande spécificité que le plasmide KO CRISPR/Cas9 correspondant.
- Les séquences des paires d'ARNg sont décalées de 20 pb environ pour induire avec la Cas9 une double entaille spécifique de l'ADN génomique, qui imite un DSB
- L'un des plasmides de la paire contient un gène de résistance à la puromycine; l'autre plasmide de la paire contient un marqueur GFP pour confirmer visuellement la transfection
- Le plasmide GILZ Double Nickase (h) et le plasmide GILZ Double Nickase (h2) codent pour des paires distinctes de gRNA ciblant TSC22D3. Un ou les deux modèles peuvent être disponibles
- Après transfection, l'efficacité de knockout de gène peut être évaluée par WB, IF ou IHC en utilisant l'anticorps: GILZ Antibody (B-2): sc-515835
Informations pour la commande
| Nom du produit | Ref. Catalogue | COND. | Prix HT | QTÉ | Favoris | |
Plasmide Double Nickase (h) GILZ | sc-401424-NIC | 20 µg | $410.00 | |||
Plasmide Double Nickase (h2) GILZ | sc-401424-NIC-2 | 20 µg | $410.00 |
TSC22D3 code le leucine zipper induit par les glucocorticoïdes (GILZ), un régulateur transcriptionnel inductible qui intègre la signalisation du récepteur des glucocorticoïdes aux programmes inflammatoires et de réponse au stress. GILZ module l’expression génique en interagissant avec des facteurs de transcription et des nœuds de signalisation clés, notamment NF-κB et AP-1, influençant ainsi la production de cytokines, l’activation des cellules immunitaires et l’apoptose. Dans les cellules humaines, TSC22D3 est associé à la régulation des réponses des lymphocytes T, à la polarisation des macrophages et à la signalisation inflammatoire épithéliale, ce qui le situe dans des voies impliquées dans l’homéostasie immunitaire et le remodelage tissulaire. Une expression dérégulée de GILZ a été associée à des états inflammatoires altérés et à des modifications dépendantes du contexte de la survie et de la différenciation cellulaires, étudiées dans des modèles de biologie auto-immune, métabolique et du cancer.
GILZ Le plasmide double nickase (h) se compose d'une paire de plasmides appariés, conçus pour une édition hautement spécifique du locus TSC22D3 dans les lignées cellulaires human. Chaque plasmide exprime une nickase Cas9 D10A et un sgRNA distinct ciblant des brins d'ADN opposés au sein de TSC22D3. Lorsqu'elles sont dirigées vers des sites adjacents sur des brins d'ADN opposés, les deux nickases génèrent des cassures simple brin décalées qui, ensemble, produisent une cassure double brin décalée, nécessitant une activité coordonnée sur la cible de la part des deux guides. La cassure d'ADN qui en résulte est résolue par les voies de réparation cellulaires endogènes, le plus souvent par jonction non homologue (NHEJ), ce qui conduit à des insertions ou des délétions qui perturbent la fonction de TSC22D3. En nécessitant l'engagement de deux ARNsg au locus cible, l'approche par double nick améliore la spécificité de l'édition et offre une stratégie CRISPR complémentaire pour les applications où un contrôle supplémentaire de la précision du ciblage est souhaité.
Afin de faciliter l'identification efficace des cellules éditées, un plasmide code pour la GFP permettant la visualisation par fluorescence des populations transfectées, tandis que le plasmide compagnon porte un gène de résistance à la puromycine pour la sélection antibiotique. Ensemble, ces caractéristiques favorisent l'enrichissement efficace des populations co-transfectées et simplifient la validation des clones présentant une perturbation de TSC22D3.
Réservé à la recherche. N'est pas destiné à un usage diagnostique ou thérapeutique.