Gigaxonin 더블 틈내기효소 플라스미드 (h): sc-407001-NIC

GAN은 CUL3 기반 E3 유비퀴틴 리가아제 복합체에 대한 BTB-Kelch 계열 어댑터인 기가액소닌(gigaxonin)을 암호화하며, 특정 기질의 유비퀴틴화와 프로테아좀 분해(turnover)를 촉진합니다. 기가액소닌은 중간섬유(intermediate filament) 및 미세소관 결합 단백질의 항상성을 조절하는 핵심 조절자로서, 축삭 세포골격의 조직화와 신경세포의 무결성을 지지합니다. 단백질 품질 관리 경로와 세포골격 역학의 조절을 통해 기가액소닌은 축삭 유지, 세포 내 수송, 스트레스 반응과 같은 과정에 영향을 미칩니다. GAN의 기능 상실 변이는 비정상적인 중간섬유 축적과 축삭 병리를 특징으로 하는 신경퇴행성 질환인 거대 축삭 신경병증(giant axonal neuropathy)과 연관됩니다.

Gigaxonin 더블 니카제 플라스미드(h)는 human 세포주 내 GAN 유전자좌의 고특이성 편집을 위해 설계된 쌍을 이루는 플라스미드로 구성됩니다. 각 플라스미드는 Cas9 D10A 니카아제와 GAN 내의 반대 DNA 가닥을 표적으로 하는 고유한 sgRNA를 발현합니다. 반대 DNA 가닥의 인접 부위로 유도될 때, 두 니카아제는 서로 어긋난 단일 가닥 절단 부위를 생성하며, 이는 함께 엇갈린 이중 가닥 절단을 유발하여 두 가이드의 조화된 표적 활성을 필요로 합니다. 이렇게 생성된 DNA 절단은 내인성 세포 복구 경로, 특히 비동형 말단 결합(NHEJ)을 통해 해결되며, 이는 GAN의 기능을 방해하는 삽입 또는 결실을 초래한다. 표적 부위에서 이중 sgRNA 결합을 요구함으로써, 이중 니킹 접근법은 편집 특이성을 향상시키고 표적 정밀도에 대한 추가적인 제어가 필요한 응용을 위한 보완적인 CRISPR 전략을 제공한다.

편집된 세포를 효율적으로 식별할 수 있도록, 한 플라스미드는 형광 시각화를 위한 GFP를 발현하며, 다른 플라스미드는 항생제 선별을 위한 푸로마이신 내성 유전자를 포함하고 있습니다. 이러한 기능들은 공동 형질 도입된 세포 집단의 효율적인 농축을 지원하며, GAN 기능이 손상된 클론의 검증을 단순화합니다.

연구용으로만 사용하세요. 진단 또는 치료용이 아닙니다.