GFRα-1 CRISPR/Cas9 케이오 플라스미드 (m): sc-420539

개요

Gfra1은 글리코실포스파티딜이노시톨(GPI)로 막에 고정된 공동수용체인 GFRα-1을 암호화하며, 이는 교세포 유래 신경영양인자(GDNF)에 결합한 뒤 이를 RET 티로신 키나아제에 제시하여 하위 신호전달을 시작합니다. 이 리간드–수용체 복합체는 PI3K–AKT, MAPK/ERK, PLCγ 의존성 신호전달 등을 포함한 경로를 통해 신경세포 생존, 신경돌기(neurite) 성장, 분화를 조절하며, 신경능선 유래 조직에서도 추가적인 역할을 합니다. 생쥐에서는 GFRα-1 활성은 신장 형태형성과 정원줄기세포(spermatogonial stem cell) 유지에도 관여하는 것으로 알려져, 발생 및 조직 항상성 프로그램 전반에서의 더 넓은 기능을 반영합니다. GDNF–GFRα-1–RET 신호의 조절 이상은 실험 모델에서 신경발달 결함, 신경퇴행, 그리고 RET 구동 세포 표현형을 연구하기 위한 기전적 틀로 널리 활용됩니다.

GFRα-1 CRISPR/Cas9 KO 플라스미드 (m)는 mouse 세포주에서 Gfra1 유전자의 표적 파괴를 위해 설계된 플라스미드 풀입니다. 각 플라스미드는 Gfra1 유전자 내의 서로 다른 부위를 표적으로 하는 고유한 단일 가이드 RNA(sgRNA)와 Streptococcus pyogenes Cas9 뉴클레아제를 함께 발현합니다. 또한 이 플라스미드들은 GFP를 암호화하여, 형광 현미경이나 유세포 분석기를 통해 성공적으로 형질전환된 세포를 형광으로 식별하고 농축할 수 있게 합니다.

다중 가이드 설계는 Cas9에 의한 이중 가닥 절단 형성 후 Gfra1의 개방 독서 틀(ORF)을 파괴하는 삽입 또는 결실(indel)이 발생할 가능성을 높입니다. CRISPR/Cas9 시스템에 의해 유발된 DNA 절단은 내인성 비동종 말단 결합(NHEJ) 경로를 통해 복구되며, 이는 종종 GFRα-1 단백질 발현을 소멸시키는 프레임 시프트 돌연변이를 초래합니다.

이 CRISPR 녹아웃 시스템은 GFRα-1 신호 전달 연구, 기능 유전체학 연구, 암 생물학 연구 및 인간 세포주에서의 치료 반응 평가를 위한 Gfra1 결핍 세포 모델을 효율적으로 생성할 수 있게 합니다.

주요 특징

• GFRα-1 기능에 중요한 Gfra1 엑손을 표적하는 sgRNA
  전달을 단순화하기 위해 단일 플라스미드에서 SpCas9 및 sgRNA의 공동 발현
  형질전환된 세포 식별을 위한 GFP 리포터
  녹아웃 효율 향상을 위해 여러 Gfra1 게놈 부위를 표적하는 플라스미드 풀
  형질전환을 통한 전달과 호환

설계 변형

CRISPRs +/- HDR

• GFRα-1 CRISPR/Cas9 KO 플라스미드 (m) 및 GFRα-1 CRISPR/Cas9 KO 플라스미드 (m2)에 의해 암호화되는 gRNA는 Gfra1 유전자좌 내의 서로 다른 부위를 표적화합니다. 표적화 설계 중 하나 또는 둘 다 이용 가능할 수 있습니다. 구입 가능 여부는 관련 제품을 참조하십시오.
  GFRα-1 HDR 플라스미드 (m) 및 GFRα-1 HDR 플라스미드 (m2)에 의해 암호화되는
  HDR 기증자 컨스트럭트는 푸로마이신 내성 카세트와 RFP 리포터를 포함하며, 이는 CRISPR/Cas9 KO 설계에 해당하는 정의된 Gfra1 표적 부위에서의 상동성 유도 복구를 지원하기 위해 Gfra1 상동성 암으로 둘러싸여 있습니다. HDR 기증자의 재고 여부는 달라질 수 있습니다. 재고 여부는 관련 제품을 참조하십시오.

연구용으로만 사용하세요. 진단 또는 치료용이 아닙니다.