GATA-1 CRISPR/Cas9 케이오 플라스미드 (h): sc-400396

개요

GATA1은 조혈 과정에서 계통 특이적 유전자 발현을 조절하기 위해 WGATAR 모티프에 결합하는 아연 손가락 전사인자 GATA-1을 암호화한다. GATA-1은 적혈구 성숙과 거핵세포 분화에 필수적이며, FOG1(ZFPM1) 같은 보조인자와의 상호작용 및 염색질 리모델링 조절을 통해 헤모글로빈화, 세포주기 종료, 최종 분화를 관장하는 프로그램들을 조율한다. 또한 GATA-1의 활성은 에리트로포이에틴(EPO)/JAK–STAT 신호전달과 더 넓은 전사 네트워크와 통합되어 적혈구 및 혈소판 관련 유전자 발현을 형성한다. GATA1의 발현 이상 또는 돌연변이는 선천성 혈구감소증 및 적혈구/거핵구 프로그램의 변화가 특징인 골수성 백혈병을 포함해 혈액세포의 발달과 분화 장애와 밀접한 관련이 있다.

GATA-1 CRISPR/Cas9 KO 플라스미드 (h)는 human 세포주에서 GATA1 유전자의 표적 파괴를 위해 설계된 플라스미드 풀입니다. 각 플라스미드는 GATA1 유전자 내의 서로 다른 부위를 표적으로 하는 고유한 단일 가이드 RNA(sgRNA)와 Streptococcus pyogenes Cas9 뉴클레아제를 함께 발현합니다. 또한 이 플라스미드들은 GFP를 암호화하여, 형광 현미경이나 유세포 분석기를 통해 성공적으로 형질전환된 세포를 형광으로 식별하고 농축할 수 있게 합니다.

다중 가이드 설계는 Cas9에 의한 이중 가닥 절단 형성 후 GATA1의 개방 독서 틀(ORF)을 파괴하는 삽입 또는 결실(indel)이 발생할 가능성을 높입니다. CRISPR/Cas9 시스템에 의해 유발된 DNA 절단은 내인성 비동종 말단 결합(NHEJ) 경로를 통해 복구되며, 이는 종종 GATA-1 단백질 발현을 소멸시키는 프레임 시프트 돌연변이를 초래합니다.

이 CRISPR 녹아웃 시스템은 GATA-1 신호 전달 연구, 기능 유전체학 연구, 암 생물학 연구 및 인간 세포주에서의 치료 반응 평가를 위한 GATA1 결핍 세포 모델을 효율적으로 생성할 수 있게 합니다.

주요 특징

• GATA-1 기능에 중요한 GATA1 엑손을 표적하는 sgRNA
  전달을 단순화하기 위해 단일 플라스미드에서 SpCas9 및 sgRNA의 공동 발현
  형질전환된 세포 식별을 위한 GFP 리포터
  녹아웃 효율 향상을 위해 여러 GATA1 게놈 부위를 표적하는 플라스미드 풀
  형질전환을 통한 전달과 호환

설계 변형

CRISPRs +/- HDR

• GATA-1 CRISPR/Cas9 KO 플라스미드 (h) 및 GATA-1 CRISPR/Cas9 KO 플라스미드 (h2)에 의해 암호화되는 gRNA는 GATA1 유전자좌 내의 서로 다른 부위를 표적화합니다. 표적화 설계 중 하나 또는 둘 다 이용 가능할 수 있습니다. 구입 가능 여부는 관련 제품을 참조하십시오.
  GATA-1 HDR 플라스미드 (h) 및 GATA-1 HDR 플라스미드 (h2)에 의해 암호화되는
  HDR 기증자 컨스트럭트는 푸로마이신 내성 카세트와 RFP 리포터를 포함하며, 이는 CRISPR/Cas9 KO 설계에 해당하는 정의된 GATA1 표적 부위에서의 상동성 유도 복구를 지원하기 위해 GATA1 상동성 암으로 둘러싸여 있습니다. HDR 기증자의 재고 여부는 달라질 수 있습니다. 재고 여부는 관련 제품을 참조하십시오.

연구용으로만 사용하세요. 진단 또는 치료용이 아닙니다.