GAP-43 CRISPR/Cas9 케이오 플라스미드 (m): sc-420484

개요

Gap43는 성장 관련 단백질 43(GAP-43)을 암호화하며, GAP-43은 뉴런에 풍부하게 발현되는 막 연관 인산화 단백질로 성장원뿔(growth cone)과 시냅스 전 말단(presynaptic terminal)에 위치해 신경돌기(neurite) 신장, 축삭 유도(axon guidance), 그리고 시냅스 재형성(synaptic remodeling)을 조절합니다. GAP-43의 기능은 액틴 세포골격의 역동성과 칼슘 의존적 신호전달과 밀접하게 연결되어 있으며, 막 상호작용과 가소성과 관련된 과정들을 조절하는 PKC 매개 인산화를 포함합니다. 마우스에서는 발달 과정 및 신경 손상 이후 Gap43 발현이 증가하므로, 축삭 성장과 재생 반응을 나타내는 분자 표지자로 널리 사용됩니다. GAP-43 의존 회로 재형성이 비정상적으로 일어날 경우 신경발달 및 신경퇴행성 질환 모델에서 시냅스 연결성 변화와 연관되는 것으로 보고되어, 신경망 기능의 기전 연구에서 그 중요성을 뒷받침합니다.

GAP-43 CRISPR/Cas9 KO 플라스미드 (m)는 mouse 세포주에서 Gap43 유전자의 표적 파괴를 위해 설계된 플라스미드 풀입니다. 각 플라스미드는 Gap43 유전자 내의 서로 다른 부위를 표적으로 하는 고유한 단일 가이드 RNA(sgRNA)와 Streptococcus pyogenes Cas9 뉴클레아제를 함께 발현합니다. 또한 이 플라스미드들은 GFP를 암호화하여, 형광 현미경이나 유세포 분석기를 통해 성공적으로 형질전환된 세포를 형광으로 식별하고 농축할 수 있게 합니다.

다중 가이드 설계는 Cas9에 의한 이중 가닥 절단 형성 후 Gap43의 개방 독서 틀(ORF)을 파괴하는 삽입 또는 결실(indel)이 발생할 가능성을 높입니다. CRISPR/Cas9 시스템에 의해 유발된 DNA 절단은 내인성 비동종 말단 결합(NHEJ) 경로를 통해 복구되며, 이는 종종 GAP-43 단백질 발현을 소멸시키는 프레임 시프트 돌연변이를 초래합니다.

이 CRISPR 녹아웃 시스템은 GAP-43 신호 전달 연구, 기능 유전체학 연구, 암 생물학 연구 및 인간 세포주에서의 치료 반응 평가를 위한 Gap43 결핍 세포 모델을 효율적으로 생성할 수 있게 합니다.

주요 특징

• GAP-43 기능에 중요한 Gap43 엑손을 표적하는 sgRNA
  전달을 단순화하기 위해 단일 플라스미드에서 SpCas9 및 sgRNA의 공동 발현
  형질전환된 세포 식별을 위한 GFP 리포터
  녹아웃 효율 향상을 위해 여러 Gap43 게놈 부위를 표적하는 플라스미드 풀
  형질전환을 통한 전달과 호환

설계 변형

CRISPRs +/- HDR

• GAP-43 CRISPR/Cas9 KO 플라스미드 (m) 및 GAP-43 CRISPR/Cas9 KO 플라스미드 (m2)에 의해 암호화되는 gRNA는 Gap43 유전자좌 내의 서로 다른 부위를 표적화합니다. 표적화 설계 중 하나 또는 둘 다 이용 가능할 수 있습니다. 구입 가능 여부는 관련 제품을 참조하십시오.
  GAP-43 HDR 플라스미드 (m) 및 GAP-43 HDR 플라스미드 (m2)에 의해 암호화되는
  HDR 기증자 컨스트럭트는 푸로마이신 내성 카세트와 RFP 리포터를 포함하며, 이는 CRISPR/Cas9 KO 설계에 해당하는 정의된 Gap43 표적 부위에서의 상동성 유도 복구를 지원하기 위해 Gap43 상동성 암으로 둘러싸여 있습니다. HDR 기증자의 재고 여부는 달라질 수 있습니다. 재고 여부는 관련 제품을 참조하십시오.

연구용으로만 사용하세요. 진단 또는 치료용이 아닙니다.