GalNAc-T2 CRISPR/Cas9 케이오 플라스미드 (m): sc-430824

개요

Galnt2는 마우스 폴리펩타이드 N-아세틸갈락토사민전이효소인 GalNAc‑T2를 암호화하며, 이는 골지체에 존재하는 효소로서 분비 단백질과 막 단백질의 세린/트레오닌 잔기에 GalNAc를 전달함으로써 뮤신형 O-결합 당화(O-linked glycosylation)를 개시합니다. GalNAc‑T2는 O-글리칸의 조성과 밀도를 형성함으로써 단백질 접힘, 프로테아제 감수성, 수용체–리간드 상호작용, 세포외기질 조직화에 영향을 미칩니다. 이 당화 프로그램은 분비 경로의 품질 관리와 맞물려 작동하며, 당단백질의 수송 및 세포 표면 제시가 변화함에 따라 신호전달과 세포–세포 커뮤니케이션을 조절할 수 있습니다. O-결합 당화의 이상 조절은 염증, 대사 관련 표현형, 종양 연관 글리칸 리모델링에 광범위하게 연관되어 있어, Galnt2는 질병 기전과 관련된 당단백질체 변화를 연구하는 데 유용한 핵심 지점입니다.

GalNAc-T2 CRISPR/Cas9 KO 플라스미드 (m)는 mouse 세포주에서 Galnt2 유전자의 표적 파괴를 위해 설계된 플라스미드 풀입니다. 각 플라스미드는 Galnt2 유전자 내의 서로 다른 부위를 표적으로 하는 고유한 단일 가이드 RNA(sgRNA)와 Streptococcus pyogenes Cas9 뉴클레아제를 함께 발현합니다. 또한 이 플라스미드들은 GFP를 암호화하여, 형광 현미경이나 유세포 분석기를 통해 성공적으로 형질전환된 세포를 형광으로 식별하고 농축할 수 있게 합니다.

다중 가이드 설계는 Cas9에 의한 이중 가닥 절단 형성 후 Galnt2의 개방 독서 틀(ORF)을 파괴하는 삽입 또는 결실(indel)이 발생할 가능성을 높입니다. CRISPR/Cas9 시스템에 의해 유발된 DNA 절단은 내인성 비동종 말단 결합(NHEJ) 경로를 통해 복구되며, 이는 종종 GalNAc-T2 단백질 발현을 소멸시키는 프레임 시프트 돌연변이를 초래합니다.

이 CRISPR 녹아웃 시스템은 GalNAc-T2 신호 전달 연구, 기능 유전체학 연구, 암 생물학 연구 및 인간 세포주에서의 치료 반응 평가를 위한 Galnt2 결핍 세포 모델을 효율적으로 생성할 수 있게 합니다.

주요 특징

• GalNAc-T2 기능에 중요한 Galnt2 엑손을 표적하는 sgRNA
  전달을 단순화하기 위해 단일 플라스미드에서 SpCas9 및 sgRNA의 공동 발현
  형질전환된 세포 식별을 위한 GFP 리포터
  녹아웃 효율 향상을 위해 여러 Galnt2 게놈 부위를 표적하는 플라스미드 풀
  형질전환을 통한 전달과 호환

설계 변형

CRISPRs +/- HDR

• GalNAc-T2 CRISPR/Cas9 KO 플라스미드 (m) 및 GalNAc-T2 CRISPR/Cas9 KO 플라스미드 (m2)에 의해 암호화되는 gRNA는 Galnt2 유전자좌 내의 서로 다른 부위를 표적화합니다. 표적화 설계 중 하나 또는 둘 다 이용 가능할 수 있습니다. 구입 가능 여부는 관련 제품을 참조하십시오.
  GalNAc-T2 HDR 플라스미드 (m) 및 GalNAc-T2 HDR 플라스미드 (m2)에 의해 암호화되는
  HDR 기증자 컨스트럭트는 푸로마이신 내성 카세트와 RFP 리포터를 포함하며, 이는 CRISPR/Cas9 KO 설계에 해당하는 정의된 Galnt2 표적 부위에서의 상동성 유도 복구를 지원하기 위해 Galnt2 상동성 암으로 둘러싸여 있습니다. HDR 기증자의 재고 여부는 달라질 수 있습니다. 재고 여부는 관련 제품을 참조하십시오.

연구용으로만 사용하세요. 진단 또는 치료용이 아닙니다.