galectin-6 CRISPR/Cas9 KO Plasmid (m): sc-421418

Übersicht

Das murine Gen **Lgals6** kodiert **Galectin-6**, ein β-Galaktosid-bindendes Lektin, das an kohlenhydratabhängigen Erkennungsprozessen an der Zelloberfläche und im extrazellulären Milieu beteiligt ist. Als Mitglied der Galectin-Familie kann Galectin-6 Zell-Zell- und Zell-Matrix-Interaktionen, die Organisation von Glykoprotein-Netzwerken („Lattices“) sowie nachgeschaltete Prozesse wie die Regulation der epithelialen Barriere und die Signalübertragung in Immunzellen beeinflussen. Galectin-vermittelte Signalwege werden häufig mit der Modulation von Entzündungsreaktionen, der Rekrutierung von Leukozyten und dem Gewebeumbau in Verbindung gebracht – über Interaktionen mit glykosylierten Rezeptoren und Komponenten der extrazellulären Matrix. Eine dysregulierte Lektin-Glykan-Signalgebung wurde in mehreren Geweben mit entzündlichen und fibrotischen Phänotypen assoziiert, wodurch **Lgals6** ein relevantes Ziel für mechanistische Studien zur mukosalen Immunbiologie und zur Regulation des Mikromilieus darstellt.

Das galectin-6 CRISPR/Cas9-KO-Plasmid (m) ist ein Pool von Plasmiden, die für die gezielte Disruption des Lgals6-Gens in mouse-Zelllinien entwickelt wurden. Jedes Plasmid koexprimiert eine einzigartige Single-Guide-RNA (sgRNA), die auf eine bestimmte Stelle innerhalb des Lgals6-Gens abzielt, zusammen mit der Streptococcus pyogenes Cas9-Nuklease. Die Plasmide kodieren zudem für GFP, was die fluoreszente Identifizierung und Anreicherung erfolgreich transfizierter Zellen mittels Fluoreszenzmikroskopie oder Durchflusszytometrie ermöglicht.

Das Multi-Guide-Design erhöht die Wahrscheinlichkeit, dass Insertionen oder Deletionen (Indels) entstehen, die den offenen Leserahmen von Lgals6 nach der Cas9-vermittelten Bildung von Doppelstrangbrüchen unterbrechen. Durch das CRISPR/Cas9-System verursachte DNA-Brüche werden über endogene NHEJ-Wege (Non-Homologous End Joining) repariert, was häufig zu Frameshift-Mutationen führt, die die galectin-6-Proteinexpression aufheben.

Dieses CRISPR-Knockout-System ermöglicht die effiziente Erzeugung von Lgals6-defizienten Zellmodellen zur Untersuchung der galectin-6-Signalübertragung, für funktionelle Genomstudien, in der Krebsbiologieforschung sowie zur Bewertung therapeutischer Reaktionen in menschlichen Zelllinien.

Hauptmerkmale

• sgRNAs, die auf Lgals6-Exone abzielen, die für die galectin-6-Funktion entscheidend sind
  Ko-Expression von SpCas9 und sgRNA aus einem einzigen Plasmid zur vereinfachten Verabreichung
  GFP-Reporter zur Identifizierung transfizierter Zellen
  Pool von Plasmiden, die auf mehrere Lgals6-Genomstellen abzielen, um die Knockout-Effizienz zu verbessern
  Kompatibel mit der Verabreichung durch Transfektion

Designvarianten

CRISPRs +/- HDRs

• gRNAs, die vom galectin-6 CRISPR/Cas9-KO-Plasmid (m) und vom galectin-6 CRISPR/Cas9-KO-Plasmid (m2) kodiert werden, zielen auf unterschiedliche Stellen innerhalb des Lgals6-Lokus ab. Es kann ein oder beide Targeting-Designs verfügbar sein. Siehe „Verwandte Produkte“ für Verfügbarkeit.
  HDR-Donorkonstrukte, kodiert durch das galectin-6 HDR-Plasmid (m) und galectin-6 HDR-Plasmid (m2) kodiert, enthalten eine Puromycin-Resistenzkassette und einen RFP-Reporter, flankiert von Lgals6-Homologiearmen, um die homologe Reparatur an definierten Lgals6-Zielstellen entsprechend den CRISPR/Cas9-KO-Designs zu unterstützen. Die Verfügbarkeit von HDR-Donoren kann variieren. Siehe „Verwandte Produkte“ für Verfügbarkeit.

Nur für Forschungszwecke. Nicht für diagnostische oder therapeutische Zwecke bestimmt.